HEPES, acido ethanesulfonic della piperazina idrossietilica 4, utilizza la riducibilità di HEPES ai metalli in eccesso ai gradi di pH specifici ed usa il metodo di riduzione HEPES-NaOH per preparare le nanoparticelle dell'oro. Questo metodo è semplice funzionare, veloce reagire, facile controllare, meno sottoprodotti e rispettoso dell'ambiente.
Preparazione delle nanoparticelle dell'oro
1. Prepari la soluzione acida chloroauric con una concentrazione di 0.05-10 mmol/L;
2. Prepari l'amplificatore di HEPES con una concentrazione di mmol/L 5-50 e regoli il pH dell'amplificatore di HEPES a 7.0-8.0 con l'idrossido di sodio;
3. Aggiunga il tensioattivo all'amplificatore di HEPES pronto in step2 per preparare la soluzione del tensioattivo con una concentrazione di mmol/L 1-2;
4. La soluzione del tensioattivo pronta in step3 è introdotta nel carro armato della reazione e la soluzione acida chloroauric pronta in step1 si aggiunge lentamente al carro armato della reazione secondo il rapporto molare della soluzione acida chloroauric e della soluzione del tensioattivo di 1:1-1:10 ed è mescolata alla velocità di 200-300r/min. La reazione dura il min 5-30 per ottenere una miscela che contiene i colloidi del nanogold;
5. La miscela pronta in step4 è asciugata e purificata per ottenere le particelle del nanogold.
Prendendo l'amplificatore di HEPES con una concentrazione di 50 mmol/L come esempio, il metodo di configurazione è come segue: in primo luogo, 2,38 chilogrammi di HEPES sono pesati e dissolti in 180 L dell'acqua deionizzata e poi il pH della soluzione è circa 5,4 usando un pHmetro, quindi 0,1 mol/l della soluzione dell'idrossido di sodio si aggiunge lentamente ed è mescolato continuamente fino a regolare il pH a 7,4; per concludere, l'acqua deionizzata si aggiunge a 200L.
Preparazione di HEPES
Metodo 1
Facendo uso di dicloroetano 1,2 come solvente, la piperazina idrossietilica (5.00g, 0.02mol), il carbonato di potassio K2 il CO3 (6.00g, 0.04mol), il dicloroetano 50mL 1,2 si è aggiunta in una bottiglia del tre-porto 100mL fornita di stirring meccanico e di termometro. Il bagno d'olio era heated a 90℃ (punto di ebollizione 1,2-dichloroethane 85℃) e la reazione è stata mescolata per 20h.Stop la reazione, filtro e lava il sale filtrato con 200 ml di acetato di etile (EA). Il filtrato è stato asciugato per ottenere 2,6 il solido di g HEPES.
Metodo 2
il solfito di sodio anidro 11.0g (84.5mmol), 27,0 ml (343.6mmol) di dicloroetano, 120mL l'acqua, 110mL l'etanolo, la polvere di rame 50mg si è aggiunto in tre bottiglie con il mescolatore ed il tubo magnetici di condensazione di riflusso a loro volta. Il bagno d'olio era heated e heated scaldare. Dopo riflusso per 22h, il liquido della reazione è stato evaporato a pressione ridotta per rimuovere l'acqua fino a precipitare tutti i solidi bianchi. Questo solido pricipalmente è composto di prodotti, di materie prime unreacted e di sale prodotti. Il solido e l'etanolo ottenuti 500mL si sono aggiunti in una boccetta 1L e sono stati riscaldati per riflusso per 40min.Drain ed il filtro mentre caldi e lasci il filtrato lo raffreddano, quindi lasciano a 0℃ di notte. La filtrazione di drenaggio e l'essiccazione sotto vuoto hanno provocato la cristallizzazione del fiocco con un rendimento di 11,40 g e un rendimento di 81,0%.
Il solfonato cloroetilico del sodio (15,10 g, 0,08 mol), la piperazina idrossietilica (9,88 g, 0,075 mol), 60 ml di acqua ed il bagno d'olio si sono aggiunti in quattro boccette con il mescolatore, il tubo di condensazione di riflusso ed il termometro magnetici per mescolare la reazione a 105℃. Mentre la reazione è continuato, il pH della soluzione della reazione diminuirebbe e 5 mol/LNaOH che la soluzione acquosa si è aggiunta a goccia a goccia per controllare il pH a circa 9. complessivamente 15 ml si sono aggiunti e la reazione è continuato per 5h.
Alla conclusione della reazione, la soluzione della reazione è stata diluita a 500mL con acqua e la colonna di scambio ionico superiore della resina (circa 500g) è stata dissalata e purificato stata. Dopo che la soluzione della reazione interamente è caricato stata sulla colonna, è lavato stata con acqua distillata finché l'effluente pH non fosse 6 e poi è stata lavata con acqua di ammoniaca 1mol/L. L'effluente con i punti del prodotto (pH circa 5-9) è stato raccolto per rilevazione di TLC. L'evaporazione rotatoria è stata concentrata a 150 ml, la decolorazione attivata del carbonio si è aggiunta, bagno d'olio era 110℃, riscaldamento e lo stirring per 0.5h, la filtrazione, essiccazione rotatoria del filtrato, aggiungendo l'etanolo 50mL, riscaldante il riflusso per 0,5 h, filtrazione termica, il solido bianco ottenuto dopo che asciugarsi era filtrato 8.63G.The è stato gocciolato con acido acetico glaciale, regolato a pH 5, è stato raffreddato durante la notte a 0℃ ed è stato filtrato. Il solido ottenuto era 2.80G dopo l'essiccamento. Complessivamente 11.43g del solido di HEPES è stato ottenuto in rendimento 64,5%.
Il metodo della preparazione di amplificatore di 10mmol/L HEPES è come segue: pesi esattamente 2.383g di HEPES, aggiunga l'acqua tre-cotta a vapore fresca a volume costante a 1 sterilizzazione di L.Filtration, stoccaggio a 4℃ dopo l'sotto-imballaggio. Se usato come amplificatore una volta aggiunto al medium della coltura cellulare, è raccomandato che il terreno di coltura sia stato alla larga da leggero.
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