Quali fattori possono influire sull'efficacia dell'utilizzo di ADPS come substrato cromogenico?

Nel campo del rilevamento e della diagnosi biologici, il substrato cromogenico N-etil-N - (3-sulfopropil) -3-metossianilina sale di sodio (Reagente ADPS) è diventato un reagente chiave nel test immunosorbente legato agli enzimi (ELISA), nell' analisi biochimica e in altri scenari a causa della sua elevata sensibilità e stabilità.le sue prestazioni effettive sono spesso influenzate da più fattori, che porta a fluttuazioni di intensità del colore, interferenze di sfondo o scarsa ripetibilità.

1,Qualità del substrato

Purezza chimica: la presenza di impurità può causare una colorazione non specifica o un'inibizione competitiva.gli intermedi incompletamente reagiti possono interferire con il legame degli enzimi con i substratiLa scelta di materie prime ad alta purezza (≥ 98%) ADPS è un prerequisito per garantire l'efficacia.

ADPS in polvere

Uniformità delle particelle: l'ADPS è generalmente presente in polvere o in forma cristallina.che influenzano l'uniformità della concentrazione nel sistema di reazioneLe particelle grossolane possono anche ostruire le microplate o le condotte degli strumenti, ed è necessaria l'ottimizzazione mediante la macinazione o il setaccio.

Stabilità di conservazione: l'ADPS è sensibile alla luce, all'umidità e alla temperatura. L'esposizione a lungo termine a luce intensa può innescare reazioni di fotolisi, producendo prodotti incolori o a basso colore;Tuttavia, ambienti ad alta umidità possono causare l'assorbimento di umidità e un'aggregazione, influenzando la precisione della pesatura.e condizioni di bassa temperatura per evitare ripetuti congelamenti e scioglimenti.

2,Condizioni di reazione

Se il pH del tampone si discosta da questo intervallo, l'attività enzimatica può diminuire.risultante in insufficiente intensità di colore ADPSIl fosfato, il carbonato e altri sistemi tampone devono essere selezionati in base alle caratteristiche dell'enzima bersaglio e calibrati con precisione con un pH-meter.

Controllo della temperatura: l'aumento della temperatura può accelerare il movimento molecolare e aumentare la frequenza di collisione tra enzimi e substrati,ma superare la temperatura ottimale può causare denaturazione e inattivazione dell' enzima, con conseguente diminuzione del segnale ADPS a colori.

3,Normalizzazione operativa

Dissoluzione e diluizione: la polvere di ADPS deve essere sciolta in acqua deionizzata o in una soluzione tampone specializzata, evitando l'uso di soluzioni contenenti ioni metallici o solventi organici.agitare delicatamente o mescolare per evitare che si formino bolle a causa di violenti scosseDiluire secondo un gradiente e mescolare accuratamente per evitare un'eccessiva concentrazione locale.

Selezione della soluzione di terminazione: dopo aver completato la reazione di colore, la soluzione di terminazione deve essere aggiunta immediatamente per fissare il colore.i prodotti coloranti possono continuare a decomporsi, con conseguente diminuzione dei valori di assorbimento; tuttavia il pH o la deviazione di concentrazione della soluzione terminale possono alterare le caratteristiche spettrali del prodotto,che influenzano l'accuratezza del rilevamento.

4,Fattori di interferenza esterna

Interferenza del campione: l' emoglobina, i lipidi o i metaboliti del farmaco nei campioni di sangue possono inibire l' attività enzimatica attraverso l' assorbimento o le reazioni chimiche.o si legano direttamente all'ADPS per formare complessi incolori.

Reazione incrociata del reagente: se nel sistema di rilevamento sono presenti composti con strutture simili all'ADPS (come altri substrati di anilina), può causare lo sviluppo di colori non specifici.

Contaminazione del contenitore: se la microplate o il piatto colorimetrico non sono puliti a fondo, possono rimanere enzimi o substrati della partita precedente, portando a risultati falsi positivi.

L'uso scaduto di polvere di ADPS non solo comporta una distorsione dei dati sperimentali, ma può anche causare rischi per la sicurezza.è importante prestare attenzione alla data di produzione e alla durata di conservazioneHubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. è specializzata nella produzione di nuovi reagenti di Trinder come l'ADPS.Per favore, sentitevi liberi di contattarmi in qualsiasi momento.!

Imballaggio del prodotto

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