Metodo ed applicazione di configurazione dell'amplificatore di pH 10 Tromethamine Tris

I vantaggi e gli svantaggi del metodo e dell'applicazione di configurazione dell'amplificatore di Tris

Il nome di prodotto cinese di Tris è aminomethane (idrossimetilico) di tris; tromethamine; tromethamine; 2 amino-2- (idrossimetilici) - 1,3-propanediol. È un cristallo o una polvere bianco. Sostanza solubile in etanolo ed acqua, leggermente sostanza solubile in acetato e benzene di etile, corrosivi ai prodotti chimici di rame e di alluminio ed irritanti.

Tris ha un alto potere tampone, l'alta solubilità in acqua ed è inerte a molte reazioni enzimatiche, rendenti a Tris un amplificatore molto soddisfacente per molti scopi biochimici. Ha usato generalmente per stabilizzare il pH del sistema di reazione, con un forte potere tampone fra pH 7.5-9.0.

Vantaggi dell'amplificatore di Tris:

①Poiché la base di Tris è altamente alcalina, questo sistema tampone può essere utilizzato per preparare gli amplificatori con una vasta gamma di gradi di pH che variano da acido ad alcalino;

②Ha poca interferenza al processo biochimico e non precipita con calcio, gli ioni del magnesio e gli ioni di metalli pesanti.

Svantaggi dell'amplificatore di Tris:

①Il pH dell'amplificatore notevolmente è colpito dalla concentrazione della soluzione, l'amplificatore è diluito dieci volte ed il cambiamento di pH è maggior di 0,1;

②L'effetto di temperatura è grande ed il mutamento di temperatura ha una grande influenza sul pH della soluzione tampone, △pKa/℃=-0.031, per esempio: il pH della soluzione tampone a 4℃=8.4, quindi al pH=7.4 37℃, in modo da deve essere di preparare alla temperatura di uso. L'amplificatore Tris-HCl pronto alla temperatura ambiente non può essere usato a 0℃~4℃;

③È facile da assorbire la CO2 nell'aria, in modo dall'amplificatore pronto dovrebbe essere sigillato strettamente;

④Questo amplificatore ha certo effetto di interferenza su alcuni elettrodi di pH, così un elettrodo compatibile con la soluzione di Tris dovrebbe essere usato.

Metodo di configurazione dell'amplificatore di Tris:

Ci sono due modi preparare l'amplificatore Tris-HCl: prepari 0,05 mol/l Tris e 0,05 soluzioni dell'HCl di mol/l rispettivamente e poi la miscela secondo i volumi elencati nella tavola comune. Tuttavia, perché la concentrazione standard di acido cloridrico diluito non è facile da preparare, un altro metodo è comunemente usato: Prenda la configurazione di 1 L 0,1 soluzione tampone dell'Tris-HCl di mol/l come esempio: in primo luogo pesi la base di 12,11 il g Tris e dissolversi in acqua deionizzata 950 ml mL~970, mentre si mescolano, aggiunga un HCl di 4 N a goccia a goccia, utilizzi un pHmetro per misurare il pH della soluzione al pH desiderato e poi aggiunga l'acqua per compensare 1 L.

Gamma dell'amplificatore pH di Tris:

L'amplificatore di Tris è un amplificatore ampiamente usato nella ricerca biochimica. La sua efficace gamma comunemente usata di pH è nella gamma «neutrale», come:

Amplificatore Tris-HCl: pH=7.5~8.5

soluzione tampone del Tris-fosfato: pH=5.0~9.0

Applicazione della soluzione tampone di Tris:

Nell'amplificatore dell'elettroforesi, forma un sistema tampone con glicina per stabilizzare il pH; utilizza il sistema tampone Tris-HCl nel gel per stabilizzare il pH; è ampiamente usato come solvente per gli acidi nucleici e le proteine; la forza ionica bassa dell'amplificatore di Tris può anche essere usata per formazione dei nematodi di fibre intermedie; aggiunga gli ED alla soluzione tampone di acido cloridrico di Tris per fare «l'amplificatore di TE», che può essere usato per stabilizzazione e stoccaggio del DNA; cambi la soluzione acida diregolazione ad acido acetico per ottenere «l'amplificatore di TAE», sostituiscala con acido borico è disponibile come amplificatore di TBE. Questi due amplificatori sono usati spesso negli esperimenti acidi nucleici dell'elettroforesi.