Il ruolo del triidrossimetilaminometano 77-86-1 negli esperimenti di Western blot

Il Western blot è una tecnica classica in biologia molecolare per il rilevamento di proteine specifiche, che prevede più passaggi come il trattamento del campione, la separazione elettroforetica, la stampa di trasferimento,e rilevazione di anticorpi.Triidrossimetilaminometano, come agente tampone del nucleo, fornisce un supporto critico per l'accuratezza e la riproducibilità degli esperimenti mantenendo un ambiente pH stabile, ottimizzando la resistenza agli ioni,proteggere l' attività proteica.

1,Ambiente pH stabile, che protegge la struttura proteica

La distribuzione della carica, la solubilità e l'esposizione agli epitopi antigeni delle proteine dipendono fortemente dal valore del pH.0) è altamente compatibile con le condizioni comunemente utilizzate negli esperimenti occidentali, e può resistere efficacemente alle fluttuazioni del pH causate dall'aggiunta di reagenti chimici o reazioni elettrochimiche durante il processo sperimentale.

Triidrossimetilaminometano in polvere

Durante la fase di lisi del campione, il tampone di lisi contenente triidrossimetilaminometano mantiene un ambiente da neutro a debolmente alcalino, inibisce l'attività endogena della proteasi,e impedisce la degradazione della proteina bersaglioNella preparazione del gel SDS-PAGE, il trimetilaminometano, l'acrilammide, il persulfato di ammonio e altri componenti formano congiuntamente un sistema di polimerizzazione stabile.la cui stabilità del pH garantisce che il diametro dei pori del gel sia uniforme, e evita la precipitazione o il cambiamento conformazionale delle proteine a causa dell'acidificazione locale.il triidrossimetilaminometano nel tampone di trasferimento neutralizza la carica superficiale della membrana, riduce il legame non specifico tra la proteina e la membrana e protegge ulteriormente l' antigeneità della proteina.

2,Ottimizzare il sistema di elettroforesi per ottenere una separazione precisa

La progettazione della concentrazione di triidrossimetilaminometano è stata ottimizzata: una concentrazione troppo bassa può portare a una conducibilità insufficiente e a una corrente instabile.può causare riscaldamento del gel o diffusione a bandaLa sua resistenza ionica moderata può non solo garantire l'efficienza dell'elettroforesi, ma anche mantenere la stabilità della dimensione dei pori del gel,in modo che le diverse proteine di peso molecolare possano essere separate chiaramente.

3,Promuovere l'efficienza del trasferimento e garantire la migrazione completa delle proteine

Mantenimento dell'equilibrio ionico: il Tris (idrossimetil) aminometano, la glicina e il metanolo insieme formano una soluzione di stampa di trasferimento.3) garantisce che la proteina mantenga la sua conformazione naturale durante il processo di stampa di trasferimento, evitando denaturazione o precipitazione.

Ottimizzazione della guida del campo elettrico: il sistema di glicina triidrossimetil aminometano forma un gradiente di campo elettrico stabile, spingendo le proteine a migrare verso la membrana ad un tasso costante.Il metanolo può distruggere la struttura della rete del gel, mentre il trimetolaminometano può bilanciare la resistenza ionica attraverso la tamponatura, impedendo l'eccessivo accumulo di cariche superficiali della membrana,e quindi migliorare l'efficienza di trasferimento delle proteine di grande peso molecolare.

Protezione della proteina della membrana: le proprietà chimiche lievi del triidrossimetilaminometano impediscono che la proteina della membrana venga danneggiata da acidi o basi forti,assicurando la completa esposizione degli epitopi di antigene, migliorando così la sensibilità e la precisione del legame con gli anticorpi.

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