Applicazione del tampone biologico CAPS 1135-40-6 nel kit diagnostico PCR

Le proprietà chimiche del CAPS: il "punto d'equilibrio d'oro" per la tamponatura di base debole

Il CAPS è un tampone zwitterionico con un valore di pKa di 10,4 (25 °C), che presenta un'eccellente capacità di tamponamento in ambienti alcalini.l'intervallo di buffering di CAPS (pH 9.7-11.0) è più conforme alle esigenze di alcuni sistemi speciali nelle reazioni di PCR. Il gruppo cicloesilamina nella struttura molecolare del tampone CAPS gli conferisce una buona idrofobicità,mentre il gruppo acido sulfonico assicura la solubilità in acquaQuesta caratteristica di "flessibilità e rigidità" consente al CAPS di mantenere la stabilità del pH della soluzione riducendo al contempo le interferenze non specifiche con l'attività enzimatica.fornire un ambiente mite e stabile per le reazioni di PCR.

CAPS in polvere

Il ruolo fondamentale del CAPS nella PCR

1La stabilità del pH assicura l' attività enzimatica:CAPS regola con precisione il valore del pH del sistema di reazione per evitare la deviazione del pH causata dall'evaporazione della soluzione o dalla degradazione chimica durante le fasi di denaturazione ad alta temperatura, assicurando che l'enzima catalizza la sintesi del DNA in condizioni ottimali e migliora significativamente l'efficienza di amplificazione.

2- Inibizione del legame non specifico e miglioramento della specificità: il CAPS mantiene una resistenza agli ioni stabile, riduce la probabilità di disallineamento del modello del primer,e la sua struttura chimica unica può ridurre la tensione superficiale della soluzione, ottimizzare la formazione di goccioline e ridurre ulteriormente il rumore di fondo nel rilevamento ad alta precisione come la PCR.

3. Compatibile con campioni complessi e con una maggiore capacità anti-interferenza: i campioni clinici (come sangue e saliva) contengono spesso inibitori che possono interferire con le reazioni PCR.Il sistema tampone del CAPS può neutralizzare l' effetto di carica di alcuni inibitori, combinato con l'effetto di denaturazione dell'ambiente alcalino su alcuni inibitori proteici, migliorando significativamente l'adattabilità del kit a campioni complessi.

Casi pratici di applicazione del CAPS: validazione estesa dal laboratorio all'ambiente clinico

Nel rilevamento degli acidi nucleici del COVID-19, CAPS è stato incluso nella formula del kit PCR da diverse organizzazioni autorevoli.un kit di reagenti di una certa marca utilizzando il sistema tampone CAPS ha mostrato una maggiore sensibilità nei test comparativi ed è stato in grado di mantenere la stabilità del pH in condizioni di alta temperaturaInoltre, in scenari quali il rilevamento di mutazioni di malattie genetiche e l'analisi dei marcatori tumorali,l'ambiente alcalino debole del CAPS può ottimizzare l'efficienza di legame della sonda, aumentano l'intensità del segnale di fluorescenza e forniscono supporto per il rilevamento di bersagli a bassa abbondanza.

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