Esplorare i misteri della biobuffa di alta purezza HEPES CAS 7365-45-9

La lattato deidrogenasi (LDH), uno degli enzimi chiave nella via di glicolisi intracellulare, subisce cambiamenti nella sua attività in varie condizioni patologiche.La misurazione accurata dell'attività della LDH è di grande importanza non solo per la ricerca scientifica di baseLa scelta del buffer appropriato è uno dei fattori chiave per garantire l'accuratezza dei risultati dei test durante questo processo.

Acido etanosulfonico di idrossietil piperazina (Buffer HEPES), come tampone biologico ampiamente utilizzato, sta gradualmente diventando il componente centrale dei kit di rilevazione della lattato-deidrogenasi.Questo articolo analizzerà in dettaglio il ruolo chiave dell'HEPES nella rilevazione della lattato-deidrogenasi da molteplici prospettive, compresa la sua importanza e applicazione nel rilevamento della LDH.

HEPES in polvere

L' importanza dell' HEPES nella rilevazione della lattato-deidrogenasi

La reazione redox tra lattato e piruvato catalizzata da LDH richiede un intervallo di pH specifico per mostrare un'attività ottimale.l' attività dell' enzima può diminuire o persino scomparire completamentePertanto, l'aggiunta di agenti tampone al sistema di rilevamento della lattato-deidrogenasi è un passo chiave per garantire l'accuratezza del rilevamento.

L'HEPES svolge un ruolo cruciale nei kit di rilevamento della lattato-deidrogenasi grazie alle sue eccellenti prestazioni di tamponamento.questa è una reazione reversibile, e quando la concentrazione di acido lattico è elevata, promuove la reazione inversa, cioè la sintesi di acido piruvico dall'acido lattico.,L'acido L-lattico reagisce con NAD+ per produrre acido piruvico e NADH.il che significa che l' attività di LDH può essere quantificata monitorando le variazioni di assorbimentoPertanto, l'HEPES non solo mantiene la stabilità del pH del sistema di reazione, ma fornisce anche una garanzia per la determinazione accurata del contenuto di lattato disidrogenasi.

Applicazione di HEPES nel kit di rilevazione della lattato-deidrogenasi

Il kit di reagenti utilizzato per il rilevamento della lattato-deidrogenasi è di solito costituito da reagenti indipendenti I e II.

Nel reagente I, l' HEPES agisce come tampone biologico e forma un sistema di reazione con complessi di ioni metallici, substrati LDH, tensioattivi, attivatori dell' enzima LDH, conservanti e acqua.L'HEPES è principalmente responsabile del mantenimento della stabilità del pH del sistema di reazione e della creazione di un ambiente di reazione adatto per il substrato di lattato deidrogenasiAllo stesso tempo, interagisce con complessi di ioni metallici per garantire che gli ioni metallici (come gli ioni zinco nella lattato-disidrogenasi) siano in uno stato chimico stabile,mantenere la conformazione attiva dell'enzimaInoltre, i tensioattivi, gli attivatori enzimatici e altri componenti possono favorire meglio le reazioni nell'ambiente pH stabile creato dall'HEPES.

Nel reagente II, l'HEPES esiste anche e funziona insieme allo stato di ossidazione del nicotinamide adenina dinucleotide (NAD +), ai tensioattivi, ai conservanti e all'acqua.come coenzima nelle reazioni catalizzate dalla lattato-deidrogenasi, è altamente sensibile al pH nelle reazioni redox alle quali partecipa.L'HEPES può garantire che il NAD + si sinergizzi con la lattato-deidrogenasi in condizioni di pH adeguate per completare il processo di ossidazione ridotta del substratoInoltre, l'HEPES agisce anche insieme ai conservanti per mantenere la stabilità del reagente II e prolungare la durata del kit del reagente.

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