Perché l' HEPES buffer 7365-45-9 viene utilizzato nel rilevamento della lattato deidrogenasi

La lattato deidrogenasi (LDH), uno degli enzimi chiave nella via di glicolisi intracellulare, subisce cambiamenti nella sua attività in varie condizioni patologiche.La misurazione accurata dell'attività della LDH è di grande importanza non solo per la ricerca scientifica di baseLa scelta del buffer appropriato è uno dei fattori chiave per garantire l'accuratezza dei risultati dei test durante questo processo.

Acido etanosulfonico 4-idrossietilpiperazina (Buffer HEPES), come tampone biologico ampiamente utilizzato, sta gradualmente diventando il componente centrale dei kit di rilevazione della lattato-deidrogenasi.Questo articolo analizzerà in dettaglio da molteplici prospettive perché il tampone HEPES è utilizzato nella rilevazione della lattato-deidrogenasi.

Buffer HEPES

1, Caratteristiche di base dell' HEPES

L'HEPES è un tampone zwitterionico contenente gruppi amino e carbossilici, con formula molecolare C8H18N2O4S.e solido inodore con buona solubilità in acqua e stabilità chimica.

L'intervallo di tamponamento dell'HEPES è compreso tra il pH 6,8 e 8.2, e per il rilevamento di LDH, il suo ambiente catalitico è di solito entro questo intervallo di pH.L'HEPES può mantenere efficacemente la stabilità delle condizioni di reazione e garantire l'accuratezza della misurazione dell'attività enzimaticaInoltre, la capacità di tamponamento dell'HEPES non è influenzata dalla concentrazione di CO2, particolarmente importante per la coltura cellulare e le reazioni biochimiche in ambienti aperti.

2, Applicazione dell' HEPES nel rilevamento della LDH

L'HEPES, come uno dei componenti principali del kit di rilevamento della lattato-deidrogenasi, svolge molteplici funzioni.con reagente I contenente tampone biologico HEPES, complesso di ioni metallici, substrato di reazione LDH, tensioattivo, attivatore dell' enzima LDH, conservante e acqua; il reagente II è costituito da HEPES, nicotinamide adenina dinucleotide ossidato NAD+, tensioattivo,conservanteL'aggiunta separata di diversi componenti funzionali permette di controllare meglio le condizioni di reazione e di ridurre le interferenze causate dalla turbidità del campione stesso.

3, Migliorare la precisione e l'efficienza del rilevamento

Buona stabilità: l'effetto tampone fornito dall'HEPES garantisce la stabilità del pH durante l'intero processo di rilevamento, che è fondamentale per la misurazione dell'attività enzimatica.

Alta precisione: ottimizzando la formula e applicando rigorose misure di controllo della qualità, vengono garantiti risultati costanti per ogni prova.

Ampia gamma di test lineari: in grado di coprire una vasta gamma di livelli di attività della LDH, adattarsi a diversi tipi di campioni e soddisfare diverse esigenze cliniche.

Forte capacità anti-interferenza: resiste efficacemente all'influenza di fattori esterni quali variazioni di temperatura o impurità del campione, garantendo l'autenticità dei dati.

Nessuna necessità di pre-diluizione: semplifica le fasi sperimentali, accorcia il tempo di rilevamento, particolarmente adatto per ambienti clinici affollati.

4Principio di reazione e misurazione

Il processo di riduzione catalizzata da LDH dell'acido piruvico in acido L-lattico è una reazione reversibile, e quando la concentrazione di acido lattico è elevata, promuove la reazione inversa, cioèla sintesi dell'acido piruvico da acido latticoIn condizioni di pH adeguate mantenute nel tampone HEPES, l'acido L-lattico reagisce con NAD+ per produrre acido piruvico e NADH.il che significa che l' attività di LDH può essere quantificata monitorando le variazioni di assorbimento.

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