Perché gli agenti riducenti devono essere aggiunti al tampone Tris 150-25-4

Nel campo della scienza biologica, specialmente nello studio della chimica e della biochimica delle proteine, il mantenimento della stabilità e dell'attività delle proteine è cruciale.Come principale esecutore delle attività di vita, l'integrità della struttura e della funzione delle proteine ha un impatto decisivo su vari processi vitali all'interno delle cellule.le proteine sono facilmente influenzate da vari fattori ambientaliTra questi, l'ossidazione è un importante fattore di influenza,che può distruggere la struttura e la funzione delle proteine ossidando i residui di amminoacidi come la cisteina.

Tris buffer

Per risolvere questo problema, gli scienziati utilizzano in genere soluzioni tampone contenenti agenti riducenti, comeTris buffer, durante il processo sperimentale. Il tampone Tris è ampiamente utilizzato per la sua eccellente capacità di tamponamento e stabilità,ma l' uso del tampone Tris da solo non è sufficiente per proteggere efficacemente le proteine dai danni ossidativiPertanto, l'aggiunta di agenti riducenti è diventata un passo importante.

Tre agenti riducenti comuni nel tampone Tris
 

1. Ditiotreitolo (DTT)

DTT è un agente riduttore organico di piccole molecole comunemente usato e l'aggiunta di DTT al tampone Tris può prevenire l'ossidazione delle proteine.è una molecola lineare che si trasforma in una struttura ciclica esagonale contenente legami dissulfurici dopo l'ossidazioneNell'esperimento la concentrazione di DTT è di solito di 5-10 mM per garantire che la concentrazione dell'agente riduttore sia molto superiore alla concentrazione proteica nel tampone,proteggendo così la proteina dai danni ossidativi.

2. tri (2-carbossietil) fosfina (TCEP)

Il TCEP è un agente riduttore di tiolo con ampie applicazioni nella chimica delle proteine e nella ricerca sulla proteomica.ma non deve nemmeno essere rimosso in alcune reazioni di incrocio dei tioliInoltre, il TCEP ha una buona stabilità, ma il suo prezzo è relativamente elevato.

3. Mercaptoetanolo (β-mercaptoetanolo, BME)

Il mercaptoetanolo è un agente riduttore comunemente usato che può proteggere i gruppi tioli liberi sulle proteine dall'ossidazione, evitando così l'aggregazione o la denaturazione delle proteine.la capacità riduttiva del mercaptoetanolo è relativamente deboleInoltre, a causa della volatilità del mercaptoetanolo, il suo contenuto è molto elevato.può essere aggiunto alla soluzione di piscina e diffuso in goccioline attraverso la sua volatilizzazione per fornire una riduzione sostenuta.

Imballaggio del prodotto

Precauzioni per l' impiego

Il tampone Tris è generalmente preparato a temperatura ambiente, ma gli agenti riducenti come il DTT e il mercaptoetanolo si degradano facilmente a temperatura ambiente.se questi agenti riducenti vengono aggiunti al buffer, si raccomanda di conservare i prodotti in frigorifero a bassa temperatura. Inoltre, gli agenti riducenti possono essere aggiunti al tampone Tris prima dell'esperimento per garantire buoni risultati.

Nel campo dellaagenti di tamponamento biologici, Desheng fornisce ai ricercatori vari reagenti di alta qualità come Tris, MOPS, HEPES, ecc. con la sua ricca esperienza di produzione e di ricerca e sviluppo.Questi reagenti non solo garantiscono l'accuratezza e l'affidabilità dell'esperimentoInfine, i ricercatori possono selezionare e utilizzare questi reagenti in modo flessibile, mescolandoli e scegliendoli in base alle esigenze specifiche dell'esperimento.Se avete bisogno di acquistare nel prossimo futuro, per favore clicca sul sito ufficiale per saperne di più o contatta me!