Evidenziare:
4 - (2-idrossietil) - acido piperazinetano-sulfonico
, Amplificatore di HEPES
, 7365-45-9
4 - (2-idrossietil) - 1-piperazinetanesulfonico Configurazione d'uso 7365-45-9
L'hepes è un tampone bicomponente non ionico, il cui componente principale è l'acido idrossietilpiperazinaetanosulfonico.4.Buffer di Hepesha un'ampia gamma di applicazioni e, quando viene utilizzato come tampone biologico, può essere utilizzato come reagente tampone nei mezzi di coltura cellulare, come tampone ed eluente nella ricerca sulle proteine,e può essere utilizzato anche nei kit di estrazione di DNA/RNA e nei kit diagnostici PCR.
Hepes in polvere
Quando Hepes è usato come tampone, può mantenere un valore di pH relativamente costante durante la coltura aperta o l'osservazione cellulare.il dispositivo di coltura cellulare deve essere chiuso e perfetto per evitare la piccola quantità richiesta nel mezzo di coltura. Il carbonato si disperde nell'aria. Ci sono anche due modi per utilizzare tampone Hepes. dettagli come segue:
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Gli Hepes possono essere aggiunti direttamente alla soluzione di coltura preparata in base alla concentrazione richiesta, e quindi filtrati e sterilizzati.e regolare il pH a 7.2 con 1N NaOH dopo la dissoluzione e utilizzazione dopo la filtrazione e la sterilizzazione A questo punto, la concentrazione d'uso di HEPES è di 10 mmol/L. |
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Prima dell'uso, prendere 99 ml di soluzione di coltura e aggiungere 1 ml di soluzione di base.L mol/L (100 x) Metodo di preparazione della soluzione di base di HEPES: sciogliere 23,8 g di HEPES in 90 ml di acqua doppiamente distillata, regolare il pH a 7,5-8,0 con 1N NaOH, quindi diluire a 100 ml con acqua, filtrare e sterilizzare e dividere in flaconcini (2 ml/ bottiglia),devono essere conservati a 4°C o -20°C. |
In esperimenti biochimici quotidiani, specialmente durante la coltura cellulare, il tampone di Hepes è di solito indispensabile.e impareremo il metodo di preparazione di Hepes insieme più tardi.
Metodo di preparazione dell'hepes: utilizzare direttamente 1,2-dicloroetano come solvente, aggiungere idrossietilpiperazina (5,00 g, 0,02 mol), carbonato di potassio K2CO3 (6,00 g, 0,04 mol), 50 ml di 1,2-dicloroetano,riscaldato in un bagno d'olio a 90°C (1, 2-dicloroetano, punto di ebollizione 85°C), e mescolato per la reazione per 20 ore. La reazione viene interrotta, filtrata e il sale filtrato lavato con 200 ml di acetato di etilo (EA).Il filtrato è stato essiccato per ottenere 20,6 g di HEPES solido.
In sintesi, l'applicazione del tampone Hepes è molto ampia e il metodo di utilizzo e preparazione non è complicato.e in realtà ci sono solo pochi produttori nazionali realiPertanto, il mercato è attualmente misto, con molti intermediari che guadagnano la differenza.
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