CAS 1135-40-6 CAPS Acido propanesulfonico cicloessilammina per esperimenti di buffering

Breve introduzione

Dal punto di vista della struttura molecolare, il CAPS è un acido sulfamico sostituito con cicloesano N con un peso molecolare di 221,32 e anfotero.È un buon tampone biologico con un pH di 9.7-11.1. Di solito viene utilizzato per gli esperimenti WB. Buffer per la membrana di trasferimento della proteina PVDF o per la membrana di trasferimento della nitrocellulosa NC.

Bilancio di attività

WB sta per Western blot protein immunoblotting experiment. il principio è di colorare cellule o campioni biologici trattati con elettroforesi gel con anticorpi specifici,e ottenere l'espressione di proteine specifiche nelle cellule o nei tessuti analizzati analizzando la posizione e la profondità della colorazioneLe note sperimentali sono le seguenti:

1. SDS-PAGE elettroforesi: simile al metodo di ibridazione degli acidi nucleici, tranne che il rilevato è la proteina, la sonda è l'anticorpo e l'anticorpo secondario colorato è etichettato.In generale, il sistema tampone Tri-Glicerina o Tris-Tricina viene utilizzato per le proteine a basso peso molecolare, e il sistema tampone CAPS è migliore per le proteine ad alto peso molecolare.La glicina nel buffer influenzerà il sequenziamento., quindi il buffer di trasferimento utilizzato per il sequenziamento è 10mM/1CAPS10% metanolo.un tampone ad alta concentrazione di metanolo ha un buon effetto di trasferimento sulle proteine a basso peso molecolare, mentre un tampone con una bassa concentrazione di metanolo o addirittura nessun metanolo è buono per le proteine ad alto peso molecolare.

2Quando la membrana PVDF viene lavorata, immergerla in metanolo per alcuni secondi e poi inserirla nel tampone di elettroimpressione CAPS.Se la membrana PVDF si asciuga, ripetere i passaggi precedenti. Il gel di elettroforesi deve anche essere immerso in tampone CAPS per 5-10 minuti. Alcune proteine fortemente basiche non hanno bisogno di questo passaggio.

3Le condizioni di trasferimento sono di solito 50V di tensione costante, 100-170mA di intensità di corrente e trasferimento di impronte elettriche a temperatura ambiente..Per le proteine con un peso molecolare più elevato, prestare attenzione a prolungare il tempo di trasferimento.

Imballaggio del prodotto

4. Prima di tingere, la membrana PVDF deve essere tolta e risciacquata con acqua deionizzata, imbevuta in metanolo, quindi tinto con 0,1% Coomassie blu brillante per 30-50 secondi, decolorato con 50% di metanolo,lavati con acqua deionizzata e essiccati.

In aggiunta all'esperimento stesso, Desheng Technology ricorda che per motivi di sicurezza e salute,indossare abiti da laboratorio e guanti usa e getta per l' operazioneSi raccomanda di produrre il tampone di elettromaterializzazione CAPS: DeshengLa configurazione di acido propanesulfonico cicloessilammina di alta qualità.