Reazione catalitica e principio di rilevamento della Glutammato deidrogenasi GLDH

Glutammato deidrogenasi (GLDH) o GDH è un enzima correlato al metabolismo degli amminoacidi in vivo, presente nei tessuti epatici, cerebrali e renali, ed è comunemente usato come indicatore di rilevamento per le malattie del fegato. GLDH può catalizzare la deidrogenazione dell'acido L-glutammico per produrre acido alfa-chetoglutarico, che entra nel ciclo dell'acido tricarbossilico.

L'acido glutammico è un amminoacido acido con due gruppi carbossilici nella sua molecola. Il suo nome chimico è alfa aminoglutarato e svolge un ruolo importante nel metabolismo proteico negli organismi. Partecipa a molte importanti reazioni chimiche negli animali, nelle piante e nei microrganismi. L'acido glutammico (acido 2-aminoglutarico) ha tre isomeri, l'isomero sinistro, l'isomero destro e l'isomero racemico. L-Glutammico è il suo glutammato sinistro e la glutammato deidrogenasi in grado di deidrogenazione (deaminazione ossidativa) è l'acido L-glutammico.

Glutammato deidrogenasi

La glutammato deidrogenasi è presente principalmente nei mitocondri delle cellule epatiche, cardiache e renali, con piccole quantità trovate nei mitocondri del cervello, dei muscoli scheletrici e dei globuli bianchi. Oltre a catalizzare la reazione reversibile della deidrogenazione dell'acido L-glutammico, ha anche la funzione di catalizzare altri amminoacidi, come la catalisi dell'ossidazione della L-valina, dell'acido L-2-aminobutirrico e della deaminazione della L-leucina.

Principio di rilevamento della glutammato deidrogenasi GDH:

Il principio di rilevamento dell'attività della glutammato deidrogenasi GLDH equazione di reazione del prodotto finito: α - chetoglutarato α - chetoglutarato+NH3+NADH+H+è catalizzato dalla glutammato deidrogenasi per generare glutammato GLDH+NAD++H2O NADH. Reagente: A tampone Tris HCl 0,1 M, pH 8,3 B soluzione NH4Cl 1,5 M C soluzione di acido α - chetoglutarico 0,225 M (pH 7,0-9,0) D soluzione NADH 7,5 mM E Diluente enzimatico: tampone Tris HCl 0,1 M, pH 8,3. Il consumo di NADH può essere rilevato misurando l'assorbimento della luce a 340 nm. Tempo di misurazione: 180s Tempo di ritardo: 60s Tempo di integrazione: 120s Coefficiente/fattore: 6,776 Temperatura di misurazione: 30 ± 1 ℃ 3.2 Preparazione del campione Se il campione da testare è solido, può essere sciolto in un rapporto di 10 mg di campione/1000 ul di acqua ultrapura. Sciogliere e conservare a 2-8 gradi Celsius.

La glutammato deidrogenasi è un enzima molto importante nel fegato, coinvolto nel metabolismo del glutammato, dell'alfa chetoglutarato e di altri amminoacidi. Pertanto, il rilevamento del contenuto di GDH nel siero è un indicatore importante dello stato di salute del corpo. La preparazione enzimatica GDH fornita da Desheng è la materia prima del kit di reagenti, utilizzata principalmente per il rilevamento biochimico e gli esperimenti di ricerca correlati.

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