Dovreste conoscere questa conoscenza circa tripsina porcina

Che cosa è tripsina

La tripsina (C6H15O12P3) è un genere di proteasi. In vertebrati, funziona come enzima digestivo. Nel pancreas, è sintetizzata come precursore dell'enzima trypsinogen. È secernuta come componente di succo pancreatico ed è decomposta in tripsina attivata nell'ambito della restrizione del enterokinase o della tripsina. È un'endopeptidasi che può tagliare il lato carbossilico dei residui dell'arginina e della lisina nella catena del polipeptide. Non solo funziona come enzima digestivo, ma inoltre limita la decomposizione dei precursori di altri enzimi quali il chymotrypsinogen, la carbossipeptidasi e la fosfolipasi ed ha un effetto di attivazione. È la proteasi più specifica e si è trasformato in in uno strumento indispensabile nella determinazione della sequenza aminoacidica di proteina.

Introduzione di tripsina porcina

La massa molecolare relativa di trypsinogen porcino è circa 24 000. Secondo la differenza nel punto isoelettrico, trypsinogen porcino può essere diviso in anionico (pl6.8<6>). Poiché il tipo cationico non solo ha un più grande peso specifico, ma inoltre ha migliore stabilità che il tipo anionico, il trypsinogen porcino cationico è stato selezionato per costruzione e l'espressione. Trypsinogen porcino contiene 12 cisteine, che possono formare 6 paia dei legami bisolfurico (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), che notevolmente hanno aumentato la difficoltà di denaturazione ed il renaturation delle inclusioni negli esperimenti successivi.

Applicazione di tripsina porcina

La tripsina porcina è un genere di tripsina, che può essere usato come additivo per la rimozione delle cellule aderenti di superficie, la produzione dei vaccini del virus dell'influenza, insulina ed altre proteine, l'idrolisi rapida delle proteine ed il pretrattamento delle cellule e dei tessuti animali. C'è una grande domanda di tripsina con elevata purezza e forte attività. Attualmente, un processo della preparazione di trypsinogen porcino recombinante è stato stabilito e la tripsina porcina recombinante ottenuta ha buona attività enzimatica e non contiene l'altro inquinamento animale di fonte, che fornisca una determinata base sperimentale per la ricerca e la produzione industrializzate.

Caratteristiche di tripsina porcina

La tripsina porcina è instabile nella natura ed all'nell'autolisi incline. Nel costruire un sistema trypsinogen porcino recombinante di espressione, questa caratteristica di autolisi lo rende difficile affinchè il sistema eucariotico di espressione si verifichi trypsinogen completo ed il prodotto attivato colpiranno l'ospite. Le cellule possono anche essere tossiche, in modo da studi la possibilità di scegliere un sistema prokaryotic di espressione. Inoltre, le caratteristiche di autolisi richiedono che gli stati di attivazione di trypsinogen porcino anche di avere bisogno di di essere controllato rigorosamente.

Metodo della preparazione di tripsina porcina

Nel metodo tradizionale della preparazione, c'è molto punti di purificazione e della separazione e un molto periodo, che è facile da danneggiare la proteina e l'inattivazione di causa. Con conseguente rendimento basso. Di conseguenza, la preparazione e la produzione di tripsina porcina si è spostata gradualmente dall'estrazione dal pancreas animale a produzione recombinante di espressione. La produzione di tripsina costruendo un sistema trypsinogen-derivato porcino recombinante di espressione di Escherichia coli può anche evitare il rischio di contaminazione relativa dell'agente patogeno ed il rischio di trasporto dei virus sconosciuti dovuto l'origine animale del donatore.