Quale amplificatore Tris o EPPS è adatto a metodo del fenolo della folina da individuare la proteina?

La gamma di amplificatore di Tris è circa 6-8, che è adatto alla maggior parte dei esperimenti biochimici, particolarmente negli esperimenti relativi della ricerca di proteina e di acido nucleico; EPPS è inoltre adatto a proteina e ad acido nucleico. L'esperimento della ricerca è più costoso di Tris, in modo da quale è adatto a metodo del fenolo della folina da individuare l'esperimento della proteina?

Il metodo del reagente del Folina-fenolo è un metodo di base comunemente usato determinare la concentrazione nella proteina ed è stato ampiamente usato nel campo della biochimica. Nelle applicazioni pratiche, EPPS (HEPPS) è usato solitamente come amplificatore affinchè il metodo del fenolo della folina individui il contenuto proteico, piuttosto che usando l'amplificatore di Tris.

L'amplificatore Tris e EPPS è usato per rilevazione del contenuto proteico

Il principio di coloritura del metodo del fenolo della folina per la determinazione del contenuto proteico è lo stesso di quello del metodo del biureto (ma di EPPS non può essere usato per biureto/rilevazione del biureto). La differenza è che il secondo reagente, il reagente del Folina-fenolo, si aggiunge. per aumentare la quantità di colore, quindi migliorante la sensibilità di rilevazione delle proteine. Il vantaggio del metodo del fenolo della folina per la rilevazione del contenuto proteico è che ha alta sensibilità ed è molto più sensibile del metodo del biureto. Naturalmente, inoltre presenta alcuni svantaggi che richiede molto tempo, la curva standard non è diritto, la specificità è povera e ci sono più sostanze di interferenza.

Qualsiasi gruppo che interferisce con la reazione del biureto, quali - CO-NH2, - l'amplificatore di CH2-NH2, di CS-NH2 e di Tris, il saccarosio, il solfato dell'ammonio ed i composti solfidrilici, può interferire con la reazione del Folina-fenolo e colpire gli ultimi molto più grandi. Inoltre, fenoli ed acido citrico anche interferire con questa reazione.

il reagente del Folina-fenolo consiste di due reagenti. Il reagente uno consiste del carbonato di sodio, dell'idrossido di sodio, del solfato di rame e del tartrato di sodio del potassio. Il legame peptidico nella proteina reagisce con la soluzione del tartrato del rame del sodio del potassio nelle circostanze alcaline per formare un complesso rosso porpora. Il secondo reagente è composto di acido fosfomolibdico, l'acido fosfotungstico, l'acido solforico, il bromo ecc. Nelle circostanze alcaline, questo reagente è ridotto facilmente dal gruppo fenolico di tirosina nella proteina per dare una reazione blu e la sua intensità del colore è proporzionale al contenuto proteico. Questo metodo è inoltre adatto a determinare il contenuto di tirosina e di triptofano. La gamma di misura di questo metodo è proteina 25-250μg.

Riassumendo, il vantaggio del metodo del fenolo della folina per la determinazione del contenuto proteico è l'alta sensibilità, ma lo svantaggio è che richiede molto tempo ed interferisce. Tris può anche causare l'interferenza. L'amplificatore di EPPS dovrebbe essere usato. Desheng produce entrambi amplificatori, per non dire quale è migliore, ma essere adatto a studi sperimentali differenti.