Luminolo, ilSubstrato luminescentedella perossidasi di rafano HRP, è chimicamente denominato idrazide di acido 3-aminoftalatico e talvolta contiene anche isoluminolo e suoi derivati come ABEI, ITCI, ecc.,che sono i reagenti di questo tipo di reagenteIl processo di sintesi di questo tipo di reagente influisce direttamente sulle sue prestazioni di luminescenza, che a loro volta influenzano il risultato di rilevamento.
Il processo di sintesi di luminolo, isoluminolo e suoi derivati si basa tutti su idrazide 3-aminoftalatico.Ecco una breve introduzione alla loro trilogia di sintesi:
1. Sintesi di acido 3-nitroftalico
Il luminolo e l'isoluminolo sono entrambi preparati dalla reazione dell'acido nitroftalico e dell'idrazina ed è una materia prima importante per il processo di sintesi.il costo sarà più alto, oppure possono essere prodotte da sole. Mescolare 12 ml di acido solforico concentrato e 12 g di anidride ftalatica e riscaldare, aggiungere lentamente 10 ml di acido nitrico fumante a goccia,e controllare la temperatura a 100-110°C.
Dopo aver completato la reazione, viene raffreddato per ottenere il prodotto acido 3-nitroftalico e il sottoprodotto acido 4-nitroftalico.aggiungere acqua e filtrare per ottenere il solido acido 3-nitroftalico grezzo, e quindi utilizzare l'acqua per il solido ricristallizzare per ottenere il prodotto.
Tre fasi della sintesi del luminolo
2. Sintesi di idrazide 3-nitroftalico
Mettere 1,3 g di acido 3-nitroftalico e 2 ml di idratato di idrazina al 10% in un pallone a due colli di 100 ml, riscaldare per sciogliere, aggiungere 4 ml di trietilenglicolo, fissare il pallone a due colli, aggiungere zeolite,Il catetere collega il flacone alla pompa d'acqua attraverso un flacone di sicurezza. Accendere la pompa d'acqua e riscaldare il flacone per mantenere la temperatura a 210-220°C. Una volta completata la reazione, interrompere il riscaldamento e il pompaggio.raffreddamento a temperatura ambiente e filtro, raccogliere cristalli di colore giallo chiaro per ottenere idrazuro di acido 3-nitroftalico.
3. Sintesi di idrazide luminolo 3-aminoftalico
Il prodotto del passaggio precedente è stato trasferito in un bicchiere, e per dissolverlo è stata aggiunta una soluzione di idrossido di sodio.e continuare a bollire per 5 minutiDopo un po' di raffreddamento, sono stati aggiunti 2,6 ml di acido acetico glaciale, e la miscela è stata raffreddata a temperatura ambiente in un bagno d'acqua fredda per precipitare cristalli gialli chiari.che sono stati lavati con aspirazione e acqua per tre volte per ottenere il prodotto finale luminolo.
Le fasi di sintesi diLuminoloAllo stesso modo, il sottoprodotto acido 4-nitroftalico può essere trasformato in isoluminolo o la sintesi di derivati di isoluminolo può essere proseguita.I substrati luminescenti attualmente sintetizzati da Desheng includono il luminolo, isoluminolo ed estere di acridinio, un reagente di chemioluminescenza diretta.