Uso e metodo di preparazione dell'agente tampone biologico PIPES in polvere

Buffer biologicoPIPEla polvere è un reagente chimico ampiamente utilizzato in esperimenti biologici e il suo nome completo è acido piperazina-1,4-dietanosulfonico.La soluzione PIPES svolge un ruolo importante nel mantenere la stabilità dell'ambiente intracellulare e proteggere le cellule dalle fluttuazioni del pHQuesto articolo fornirà un'introduzione dettagliata delle proprietà, degli usi e dei metodi di preparazione dell'agente tampone biologico PIPES in polvere.

PIPES è un reagente chimico in polvere bianca con formula chimica C8H12N2O4S e un peso molecolare di 248.26È un agente tampone zwitterionico con capacità di tampone pH stabile, in grado di mantenere un certo valore di pH in ambienti acidi o alcalini.I tubi hanno anche una elevata resistenza agli ioni e una bassa permeabilità, che lo rende ampiamente utilizzato in esperimenti biologici come la coltura cellulare, l'elettroforesi e l'immunoblotting.

L'applicazione di PIPES a tampone biologico in esperimenti biologici

La polvere PIPES, come tampone biologico, è stata ampiamente utilizzata in molti esperimenti biologici.

1. Coltura cellulare: negli esperimenti di coltura cellulare, PIPES può servire come tampone del pH per mantenere la stabilità del pH del mezzo di coltura e garantire una normale crescita e divisione cellulare.Può servire come vettore di ioni per facilitare lo scambio di ioni all'interno e all'esterno della cella, influenzando le funzioni fisiologiche della cellula.

2. Elettroforesi: negli esperimenti di elettroforesi, la polvere PIPES può essere utilizzata come setaccio molecolare e scambiatore di ioni per migliorare la risoluzione e l'efficacia dell'esperimento.in esperimenti di elettroforesi proteica, PIPES può legarsi alle proteine, rallentando il loro movimento in un campo elettrico, migliorando così la risoluzione dell'esperimento

3. Immunoblotting: nell'esperimento di immunoblotting, PIPES può essere utilizzato come componente principale del tampone transmembraneo per aiutare a trasferire le proteine dal gel alla membrana.I PIPES possono anche servire come vettore di ioni per migliorare la sensibilità e la specificità degli esperimenti.

4Purificazione delle proteine dei microtubuli: negli esperimenti di purificazione delle proteine dei microtubuli,PIPES può servire come componente principale del tampone per aiutare nell'estrazione e purificazione delle proteine dei microtubuli dai tessutiPuò anche inibire la reazione di polimerizzazione delle proteine dei microtubuli e migliorare l'efficienza di purificazione.

5. Localizzazione del perossisoma: negli esperimenti di localizzazione del perossisoma, il PIPES può servire come componente principale del tampone per assistere nella localizzazione ultrastrutturale dei perossisomi nelle cellule.Può anche proteggere le cellule dai danni dei perossisomi.

Oltre ai suddetti settori di applicazione, il PIPES può essere applicato anche in esperimenti biologici quali la separazione e la purificazione di acidi nucleici e proteine, la cristallizzazione delle proteine,In sintesi, in quanto importante tampone biologico, svolge un ruolo indispensabile in molti esperimenti biologici.

Metodo di preparazione del tampone biologico PIPES

1Preparare i reagenti e le attrezzature necessarie.

Polvere di tubi, acqua ultrapura, bottiglia di vetro, carta da pesare, bilancia elettronica, agitatore magnetico o oscillatore a vortice.

2. Pesare la polvere di tubi

Pesare accuratamente la polvere di PIPES utilizzando una bilancia elettronica basata sulla concentrazione e sul volume richiesti.7 g di PIPES in polvere devono essere pesati.

3. sciogliere la polvere di PIPES

Aggiungere la polvere PIPES pesata in una bottiglia di vetro, aggiungere una quantità appropriata di acqua ultrapura e quindi mescolare con un agitatore magnetico o un oscillatore a vortice fino a dissolversi.Si noti che è necessario utilizzare acqua ultrapura sufficiente per garantire la completa dissoluzione.

4Filtrazione e sterilizzazione

Filtrare e sterilizzare la soluzione preparata di PIPES per rimuovere le impurità e i batteri dalla soluzione.

5. Immagazzinamento e uso

Conservare la soluzione filtrata di PIPES in un flacone di vetro pulito e in frigorifero a 4 °C.deve essere aggiunta una quantità adeguata di soluzione PIPES in base ai requisiti sperimentali.

Precauzioni per l'uso di PIPES a tampone biologico

1. la polvere di tubi ha un carattere igroscopico, pertanto deve essere conservata in un ambiente asciutto per evitare l'umidità;

2Durante il processo di configurazione, si deve utilizzare acqua ultrapura o acqua deionizzata per garantire la purezza e la qualità della soluzione;

3La soluzione preparata di PIPES deve essere un liquido incolore e trasparente.e dovrebbe essere riconfigurato;

4La soluzione preparata deve essere consumata entro il tempo specificato per evitare una conservazione prolungata che possa influenzare la qualità e l' efficacia della soluzione.

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