HEPESè una sorta di tampone anfoterico degli ioni di idrogeno con una buona capacità di tampone e un lungo tempo per mantenere costante il pH.tampone di ibridazione e mezzo di coltura cellulareSecondo le sue caratteristiche, ci sono alcune differenze nella configurazione del buffer in diversi esperimenti.
Proprietà fisiche e chimiche diHEPES
Acido 2-[4-(2-idrossietil)-1-piperazinyl]etanosulfonico
Numero CAS: 7365-45-9
Formula molecolare: C8H18N2O4S
Peso molecolare: 238.3
Intervallo tampone: 6,8-8.2
Struttura molecolare:
HEPESliquore madre (reserva tampone): preparare direttamente 0,5-1 mHEPESla soluzione e la soluzione di NaOH, controllare il rapporto di miscelazione dei due per regolare il pH e quindi utilizzare acqua distillata o acqua ultra pura per fissare il volume.
Soluzione di sale tampone HEPES: aggiungere una piccola quantità di cloruro di sodio e di fosfato di idrogeno disodio nella soluzione HEPES, quindi aggiungere soluzione acquosa di NaOH, regolare il pH,aggiungere acqua distillata per un volume costante, conservare a bassa temperatura.
HEPESmezzo di coltura cellulare: aggiungere una piccola quantità di cloruro di sodio, cloruro di potassio, fosfato di idrogeno disodio, destrano, ecc. nella soluzione acquosa di HEPES, quindi regolare il pH con soluzione di NaOH,e infine conservare a volume costante e bassa temperaturaNegli esperimenti di adesione cellulare, ioni di calcio e magnesio sono generalmente aggiunti al mezzo di coltura HEPES per proteggere la cadherin delle cellule e non influenzare la formazione dell'aggregazione cellulare.
Soluzione di HA:HEPES- il mezzo di coltura cellulare BSA, che è uno dei componenti del mezzo di coltura cellulare, non contiene ioni di calcio e magnesio e contiene alcuni altri ioni di sale.Dopo il trattamento dei batteri di filtrazione, è principalmente adatto per la pulizia e la coltura in coltura primaria di cellule tissutali.
La differenza di applicazione di HEPESInoltre, la soluzione di conservazione del virus non inattivata recentemente sviluppata dalla società contiene anche il tampone HEPES.Perché non ha effetti tossici sulle cellule., non solo mantiene il pH, ma aumenta anche il tempo di sopravvivenza in vitro delle cellule ospiti del virus dopo il prelievo di campioni, conserva nella massima misura l'integrità dell'acido nucleico e delle proteine del virus,e migliora la precisione del rilevamento.