La differenza fra il luminol e l'estere di acridinium nelle applicazioni di chemiluminescenza

Come tutti sappiamo, il mercato interno del DIV ha una crescente domanda di immunoassaggi, e stanno emergendo vari tipi di immunoassaggi.ha gradualmente sostituito gli immunoassays ELISAIn base al metodo, la chemioluminescenza può essere suddivisa in: chemioluminescenza diretta, chemioluminescenza enzimatica ed elettrochimioluminescenza.Luminolo L'ester di acridinio e l'ester di acridinio sono utilizzati rispettivamente nella chemioluminescenza enzimatica e nella chemioluminescenza diretta.Luminoloe estere di acridinio nella chemioluminescenza.

I Immunoassay con enzimi chimiluminescenti

L' immunoassay con enzima chimiluminescente (CLEIA) è un immunoassay etichettato con enzima che utilizza un agente chimiluminescente come substrato per una reazione enzimatica.Dopo l'amplificazione in due fasi dell'enzima e della luminescenzaLa perossidasi è usata come enzima di etichettatura.Luminolo viene utilizzato come substrato luminescente e viene aggiunto un potenziatore di luminescenza per migliorare la sensibilità e la stabilità della luminescenza.il substrato luminescente è il fosfato di diossetano, e il vettore di fase solida sono le particelle magnetiche.

Luminol chemiluminescence

II Immunoassaggio di chimioluminescenza diretta

L' immunoassay per chemioluminescenza (CLIA) è un tipo di immunoassay che etichetta direttamente gli antigeni o gli anticorpi con agenti chemioluminescenti.Estere di acridinioè un substrato luminescente ideale e può essere ossidato da perossido di idrogeno in un ambiente alcalino per emettere luce.

1Può partecipare a reazioni di chemioluminescenza.

2Reagente coniugato stabile dopo accoppiamento con antigene o anticorpo.

3Dopo l'accoppiamento, l'effetto quantistico elevato e la potenza di reazione vengono mantenuti.

4. non deve modificare o modificare raramente le proprietà fisiche e chimiche della sostanza etichettata, in particolare l'attività immunitaria.

Il vantaggio di questo metodo è che non è influenzato dall'eccitazione, dalla diffusione della luce o dalla differenza di punto.La figura seguente mostra schematicamente il meccanismo di chimioluminescenza diretta del metodo sandwichLa figura seguente mostra schematicamente il meccanismo di chimioluminescenza diretta del metodo sandwich.

III Nel complesso,Luminoloe gli esteri di acridina sono agenti luminescenti comunemente utilizzati.Luminoloviene utilizzato come substrato enzimatico chimiluminescente insieme alla perossidasi di rafano per la chimiiluminescenza indiretta con una lunghezza d'onda massima di 425 nm. Le caratteristiche della reazione sono:elevata sensibilità e buona stabilità dell'enzimaTuttavia, lo svantaggio è che il tempo di eccitazione più lungo si traduce in una velocità relativamente lenta, che può oscurare i siti di reazione degli anticorpi durante il processo di etichettatura.Antu Biology e altri stanno usando questo metodo..

Come marcatore luminescente diretto, l'estere di acridina deve essere eseguito in condizioni alcaline contenenti H₂O₂La lunghezza d'onda massima dell'emissione luminosa è di 430 nm. Le caratteristiche di reazione sono: il sistema di luminescenza è semplice e veloce, e la luminescenza è completata entro 5 secondi,e non è necessario alcun catalizzatore, ma l'estere di acridinio è instabile nel sale tampone e facilmente idrolizzato.

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