La differenza fra il luminol e l'estere di acridinium nelle applicazioni di chemiluminescenza

Come tutti sanno, il mercato domestico di IVD ha una domanda crescente dei dosagggi immunologici ed i vari tipi di dosagggi immunologici stanno emergendo. La chemiluminescenza, come metodo con rilevazione più accurata risulta, gradualmente ha sostituito i dosagggi immunologici di ELISA. Secondo il metodo, la chemiluminescenza può essere divisa in: chemiluminescenza diretta, chemiluminescenza enzimatica e electrochemiluminescence. L'estere di acridinium e di Luminol è utilizzato nella chemiluminescenza enzimatica e dirige la chemiluminescenza, rispettivamente. Oggi discuteremo le applicazioni differenti dell'estere di acridinium e di luminol nella chemiluminescenza.

I immunotest enzimatico chemiluminescente

L'immunotest enzimatico chemiluminescente (CLEIA) è un dosagggio immunologico enzima-identificato che usa un agente chemiluminescente come substrato per una reazione enzimica. Dopo l'amplificazione a due stadi dell'enzima e della luminescenza, ha alta sensibilità. La perossidasi è usata come enzima d'etichettatura, il luminol è usato come substrato luminescente e un rinforzatore di luminescenza si aggiunge per migliorare la stabilità di luminescenza e della sensibilità. L'enzima d'etichettatura usato può anche essere fosfatasi alcalina, il substrato luminescente è fosfato del dioxetane ed il trasportatore di fase solida è particelle magnetiche.

Chemiluminescenza di Luminol

II immunotest per chemioluminescenza diretto

L'immunotest per chemioluminescenza (CLIA) è un tipo di dosagggio immunologico che direttamente identifica gli antigeni o gli anticorpi con gli agenti di chemiluminescenza. L'estere di Acridinium è un substrato luminescente ideale e può essere ossidato dal perossido di idrogeno in un ambiente alcalino per emettere la luce. L'agente chemiluminescente usato come etichetta dovrebbe riempire le seguenti circostanze:

1. Può partecipare alle reazioni di chemiluminescenza.

2. Reagente coniugato della stalla dopo l'accoppiamento con l'antigene o l'anticorpo.

3. Dopo la coppia, l'alti effetto di quantum e potere della reazione sono conservati.

4. Non dovrebbe cambiare o cambiare raramente le proprietà fisiche e chimiche della sostanza identificata, particolarmente l'attività immune.

Il vantaggio di questo metodo è che non è colpito tramite lo scattering della luce di eccitazione o la differenza del punto. La figura qui sotto mostra schematicamente il meccanismo di chemiluminescenza diretta del metodo del panino. La figura qui sotto mostra schematicamente il meccanismo di chemiluminescenza diretta del metodo del panino.

III l'in generale, Luminol e gli agenti luminescenti dell'estere dell'acridina sono agenti luminescenti comunemente usati. Luminol è usato come substrato chemiluminescente enzimatico insieme alla perossidasi del rafano per chemiluminescenza indiretta con una lunghezza d'onda massima di 425nm. Le caratteristiche della reazione sono: alta sensibilità e buona stabilità dell'enzima. Tuttavia, lo svantaggio è che il tempo maggiore di eccitazione provoca relativamente un a bassa velocità, che può oscurare i siti della reazione dell'anticorpo durante il processo d'etichettatura. Attualmente, la biologia di Antu ed altre stanno usando questo metodo. Come indicatore luminescente diretto, l'estere dell'acridina deve essere effettuato nelle circostanze alcaline che contengono la H₂ la O₂. La lunghezza d'onda massima di emissione di luce è 430nm. Le caratteristiche della reazione sono: il sistema di luminescenza è semplice e veloce e la luminescenza è completata all'interno di 5s e non c'è nessun catalizzatore necessario, ma l'estere di acridinium è instabile nel sale dell'amplificatore e facilmente è idrolizzato. Il produttore facendo uso di questo sistema è Abbott.

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