L'applicazione dell'amplificatore di HEPES

L'EPES (4- ((2-idrossietil)-1-acido piperazineetanosulfonico) è un tampone zwitterionico, numero CAS 7365-45-9,Questo tampone è generalmente usato in esperimenti biochimici per regolare il pH del sistema di reazioneNon ha effetti tossici sulle cellule e mantiene il pH per lungo tempo, viene sempre applicato in colture cellulari e cosmetici.

Buffer HEPESè un tampone anfoterico non ionico con una buona capacità di tamponamento nell'intervallo pH 7,2-7.4La sua caratteristica principale è di mantenere un valore di pH relativamente stabile nel mezzo di coltura o nell'osservazione cellulare.i tappi dei flaconi di coltura cellulare devono essere stretti per evitare che il carbonato richiesto sfugga nell'aria.

Il modo per preparare il tampone HEPES.

Il tampone di Hepes può essere aggiunto direttamente nel mezzo di coltura preparato con la concentrazione richiesta, seguita dalla sterilizzazione mediante filtro.Aggiungere 2,38 grammi di polveri di Hepes a ogni 1000 ml di soluzione di coltura,regolare il pH a 7.2 con 1NNaOH dopo dissoluzione, filtrazione e sterilizzazione prima dell'applicazione, in questo momento la concentrazione di HEPES è di 10 mmol/L.

Aggiungendo 99 ml di solvente di coltura cellulare in 1 ml di soluzione di base, la concentrazione di HEPES è anch'essa di 10 mol/L. Di seguito è riportato il modo di preparare la soluzione di base di HEPES con 1 mol/L. In primo luogo, dissolvere 23.8 g di HEPES in 90 ml di acqua doppiamente distillataIn secondo luogo, regolare il pH a 7,5-8,0 con 1N NaOH; In terzo luogo, preparare fino a 100 ml con titrante dell'acqua; In seguito, filtrare e sterilizzare prima di imballare in bottiglia da 2 ml; Infine conservare a 4°C o -20°C.

Con una resistenza alle alte temperature e un punto di fusione fino a 200°C, la polvere HEPES non si degrada in autoclave.se la soluzione acquosa di HEPES è esposta alla luce ambiente per tre ore, si produrrà perossido di idrogeno tossico (H2O2).uno è che la soluzione acquosa di HEPES deve essere tenuta lontana dalla luce per non influenzare i risultati sperimentaliDopo essere stato configurato come solvente, deve essere conservato a 4 °C e utilizzato in un breve periodo di tempo per ottenere risultati migliori.Un altro è generalmente posto in una stanza asciutta e non può essere esposto direttamente alla luce solare per lungo tempo.

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