Parecchi fattori che devono essere considerati prima della reazione di chemiluminescenza

L'analisi di chemiluminescenza sta trasformandosi in in sempre più popolare dovuto la sua sensibilità superba di rilevazione. Comunemente usato sono il luminol, il isoluminol e gli esteri dell'acridina. Nell'analisi chimica, le reazioni di chemiluminescenza sono usate per individuare gli analiti direttamente in covalenza identificati con i composti di chemiluminescenza. L'avviamento dell'etichetta chemiluminescente per una reazione luminescente genera un segnale per la rilevazione dell'analito. Il vantaggio di questo metodo è che è più semplice e più chiaro ed evita l'esigenza di più grande, relativamente etichette «appiccicose». Tuttavia, i fattori per la selezione della reazione di rilevazione, se è un'etichetta degli enzimi o un'etichetta diretta e come determinare l'intensità della luce della luce devono essere considerati prima della progettazione della reazione.

Enzima che identifica o che identifica diretto? Il metodo comune di generazione della chemiluminescenza è di usare gli enzimi identificati per catalizzare la reazione di chemiluminescenza. Ogni etichetta può iniziare le reazioni multiple di chemiluminescenza, così solitamente soltanto una o alcuni etichette/analiti degli enzimi devono essere incorporati. Il composto chemiluminescente è superiore fornito come enzima-substrato per assicurare la cinetica di saturazione. L'intensità della luce della luce è una funzione lineare della quantità di enzima identificato. L'intensità, il tasso di emissione di fotoni al secondo, è il prodotto della conversione catalitica del substrato e della vita del composto luminescente.

Il grafico di distribuzione dell'intensità/tempo di chemiluminescenza include un periodo in aumento iniziale e l'estensione della luminescenza fino al plateau o al plateau falso. Se non c'è il valore stabile del plateau, indica che il substrato è esaurito o l'enzima è inattivato. La rilevazione di chemiluminescenza prodotta dagli enzimi fornisce la grande flessibilità nel processo di misura. L'intensità della luce della luce in qualsiasi momento nel tempo che passa tramite la parte migliore può essere collegata con la quantità di enzima. Se la velocità è un tipo unico o multipunto problema del pendio di misura, potete misurarlo nel divisorio ascendente per ottenere il più alta sensibilità, tuttavia, ci non sono molti composti chemiluminescenti adatti. I candidati appropriati devono in primo luogo avere determinate funzioni per permettere il collegamento con altre molecole. Più d'importanza, una volta che l'etichetta è avviata, dovrebbe emettere tutta la luce nel più breve tempo possibile.

Quando la chemiluminescenza è emessa gradualmente durante tempo, le diminuzioni dell'intensità del segnale (fotoni/secondo) e è la cosa migliore da determinare il numero ottimale delle etichette di chemiluminescenza sulle specie da individuare basate su esperienza. Anche se più etichette dovrebbero fornire teoricamente più fotoni, se le etichette sono spaziate troppo vicino insieme, un effetto di estinzione accadrà. L'area ed il numero dei gruppi derivatizable (solitamente amminici o dei gruppi di mercapto) forniscono ulteriori restrizioni. In pratica, fino a 10-20 etichette possono essere limitate ad una macromolecola. Inoltre, più etichette sulla superficie della molecola obbligatoria, probabilmente l'etichetta interferirà con le sue proprietà obbligatorie.

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