Nella prova biochimica relativa delle preparazioni enzimatiche, oltre a misurare il contenuto, la concentrazione e la stabilità di vari indicatori da provare, ci sono inoltre indicatori per la rilevazione dell'attività enzimatica, quali glicemia, i lipidi del sangue e la creatinina. Per gli indicatori quale l'ossidasi della sarcosina e della transaminasi, l'attività enzimatica deve essere misurata.
In linea generale, l'attività enzimatica è l'attività della catalisi degli enzimi, che comprende un parametro cinetico dell'enzima- Michaelis chilometro costante, che significa la concentrazione del substrato (s) quando la reazione enzimatica raggiunge la metà della velocità massima (VM). La velocità della reazione enzimica non è uniforme, non lineare come la concentrazione, ma il numero dei metri a Changshu è costante, che è una grandezza fisica caratteristica dell'enzima. La costante di Michaelis dei cambiamenti degli enzimi con il tipo misurato del substrato, la temperatura di reazione, il pH e la forza ionica. Nelle stesse circostanze, qualunque cosa la concentrazione dell'enzima sia, la concentrazione del substrato richiesto è la stessa quando la velocità di reazione massima è raggiunta.
Metodo di misura di costante di Michaelis dell'ossidasi della sarcosina:
Prepari una soluzione della sarcosina con una concentrazione di 1,0, di 2,0, di 3,0, di 4,0, di 5,0, di 6,0, di 7,0, di 8,0, di 9,0, di 10.0mmo1/L con l'amplificatore Tris-HC1 di pH 8,0 e reagisca a 37°C per 5 minuti determinano l'attività iniziale dell'ossidazione di SOX alle concentrazioni differenti nella sarcosina. Le velocità di reazione V e 1/V sono ottenute. Secondo il metodo di tracciato reciproco del doppio di Lineweaver-Burk, con 1 [s] come l'ascissa e 1/V come l'ordinata, i chilometri e il Vmax di SOX a sarcosina sono stati calcolati.
Conclusione della costante di Michaelis dell'ossidasi della sarcosina:
La costante di Michaelis può essere usata per giudicare la specificità dell'enzima. Più piccolo il valore di chilometro, maggior l'affinità fra l'enzima ed il substrato e più adatto il substrato è come il substrato naturale dell'enzima. Secondo la prova ed il calcolo dell'ossidasi della sarcosina qui sopra, l'equazione di Michaelis è y=1232.5X+8.7012 ed il coefficiente di correlazione è 0,9947: i valori calcolati di Vmax e di chilometro di SOX a sarcosina sono 141.6mmol/L e 0.115mmol, rispettivamente/(L.min).
Dovrebbe essere notato che l'ossidasi SOX della sarcosina dalle fonti differenti ha una determinata differenza nella costante di Michaelis di sarcosina. Per esempio, il valore di chilometro di SOX da Corynebaclerium a sarcosina è 21mmol/L. Poiché la costante di Michaelis ha niente a che fare con la concentrazione dell'enzima ed il tipo di enzima, questo punto può anche essere usato per l'identificazione o la determinazione degli enzimi. Desheng biochimico mette a fuoco sul campo di rilevazione biochimica e fornisce varie preparazioni enzimatiche compreso SOX, l'esterasi del colesterolo, il glucosio ossidasi, ecc.
