Metodo per la stabilizzazione enzima e del substrato cromogeno nella reazione di Trinder

Nel campo dei sistemi diagnostici in vitro, la colorimetria degli enzimi è un metodo comune per prova quantitativa o qualitativa delle componenti dell'obiettivo ed è ampiamente usata in Cina, quale il metodo di rilevazione della reazione al colore dell'enzima HRP catalizzato dal substrato cromogeno TOOS nella reazione di Trinder. A causa della partecipazione degli enzimi, è molto utile migliorare la stabilità del substrato di colore di attività enzimatica.

Alcuni prodotti della reazione con i substrati cromogeni di alta capacità di assorbimento molare, quale TOOS, CIME, ecc., possono essere utilizzati nei metodi chimici bagnati come pure nei metodi chimici asciutti: i reagenti richiesti della reazione (TOOS, 4-AAP) e gli enzimi richiesti (HRP) ecc.) è fisso sul trasportatore della membrana ed il campione si aggiunge a goccia a goccia per generare H2O2 e poi per rilasciare il nuovo ossigeno ecologico, ossida il substrato di colore ed indirettamente determina la componente dell'obiettivo con la quantità del prodotto della reazione. Gli enzimi sono altamente specifici ed altamente efficienti nella catalisi. Tuttavia, hanno stabilità difficile sotto l'influenza della temperatura, della pressione e della luce nei metodi chimici asciutti. Nei metodi chimici bagnati, gli enzimi sono inattivati facilmente quando sono in uno stato liquido o alle concentrazioni basse.

Polvere cromogena del substrato TOOS

D'altra parte, la maggior parte dei substrati cromogeni, quale TOOS, MAOS, TMB, ecc., inoltre sono ossidati facilmente lentamente, in modo dalle loro soluzioni non possono essere esposte a lungo all'aria. Ci sono molti modi migliorare la stabilità degli enzimi biologicamente attivi e dei substrati cromogeni:

1. L'aggiunta dell'agente protettivo della soluzione degli enzimi può fare l'attività di vari enzimi quale alt, AST, LDH, ALPE, CK nella stalla della matrice del siero o della soluzione acquosa per 2 settimane alla temperatura ambiente, ma l'effetto sulla carta reattiva chimica asciutta non è significativo.

2. Il metodo colore-sviluppantesi di stabilizzazione del substrato usa i tensioattivi e le sostanze flavonoidi del pigmento con un gruppo alchile con 8 - 16 atomi di carbonio, ma la formula è complicata, i reagenti sono difficili da comprare e l'agente protettivo interferisce con i risultati dei test.

3. C'è un agente protettivo che è più riducibile del substrato colore-sviluppantesi, ma l'agente protettivo aggiunto contiene i gruppi amminici primari e spesso causa le reazioni non specifiche.

4. L'uso dei coloranti azoici come stabilizzatori del substrato colore-sviluppantesi ha un buon effetto stabilizzante e non causa l'interferenza, ma la lunghezza d'onda massima di assorbimento della tintura è a volte vicino a quella dell'agente colore-sviluppantesi, che rende al controllo in bianco un poco più su.

5. Un agente protettivo per il polimero e la sua composizione, che possono migliorare la stabilità degli enzimi e dei substrati cromogeni. I substrati cromogeni applicabili includono TOOS, 4-AA, le CIME, MAOS, ecc., adatti a HRP, a CHO, ad enzima ecc., ad adatti a rilevazione di glucosio, di creatinina, di acido urico, di colesterolo, di trigliceride e di altri indicatori.

Può essere visto che vari agenti protettivi attuali per gli enzimi o i substrati cromogeni, alcuni di cui sono difettosi, quale alto costo, rilevazione polarizzata e soltanto adatto metodi chimici bagnati, ecc., così migliorando la stabilità degli enzimi e dei substrati cromogeni il metodo ha bisogno di ulteriore ricerca. Desheng è un produttore dei substrati e degli enzimi cromogeni. È raccomandato che prestiate più attenzione all'uso dei substrati e degli enzimi cromogeni.