Istruzioni per l'uso del tampone HEPES

Acido 4-idrossietilpiperazine-etanosulfonico, denominatoHEPES, CAS n. 7365-45-9, è di solito usato come tampone biologico in esperimenti biochimici.

Proprietà fisiche e chimiche: HEPES

Formula molecolare: C8H18N2O4S

Peso molecolare: 238.31

Status: polvere cristallina

pKa:7.45-7.65

Intervallo tampone: 6,8-8.2

Struttura:

Purezza: superiore al 99%

Concentrazione di utilizzo: 10-50 mmol/l

A seconda dell'applicazione, i tamponi HEPES sono soggetti a due sistemi di tampone comunemente utilizzati:

HEPES soluzione tampone: HEPES + NaOH (500 ml): 119,15 g di HEPES sono sciolti in 400 ml di acqua distillata, aggiungere 0,5~1 M di NaOH soluzione acquosa per regolare almeno il pH richiesto,prestare attenzione alla gamma di pH tampone efficace è 6.8-8.2, e poi usare acqua distillata per rendere il volume a 500 ml;

2. HEPES soluzione salina tamponata: HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, Na2HPO4·7H2O 0,198 g, regolare il valore del pH con 0,5 M di NaOH soluzione acquosa, e rendere il volume a 500 ml.

3.2×HEPES soluzione salina tamponata: sciogliere 1,6 g di NaCl, 0,074 g di KCl, 0,027 g di Na2HPO4.2H2O, 0,2 g di glucano o di destrano e 1 g di HEPES in 90 ml di acqua distillata,e regolare al pH richiesto con 0.5M di NaOH, quindi diluito a 100 ml con acqua distillata. Nell'esperimento di adesione cellulare contiene ioni di calcio e magnesio;La soluzione di coltura cellulare HA non contiene ioni di calcio e magnesio, ma contiene BSA.

I vantaggi del tampone HEPES:

1A differenza della PEcina, l'HEPES non contiene gruppi di coordinazione e non può formare complessi stabili con la maggior parte degli ioni metallici.

2. L'HEPES ha una buona solubilità in acqua e il suo intervallo di tampone è vicino al neutro.quindi non è adatto per i sistemi redox e ha ioni relativamente grandi- La forza, PIPES è più acida.

3. L'HEPES non ha effetti tossici e collaterali sulle cellule a bassa concentrazione e può controllare un intervallo di pH costante per lungo tempo.e il mezzo di coltura generale contiene 20 mmol/L di HEPES per ottenere una capacità di tamponamentoPertanto, è comunemente utilizzato in soluzione di HA, soluzione di coltura cellulare, soluzione di conservazione del virus e persino prodotti per la cura della pelle.

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