Attualmente, il controllo del coronavirus e la forma novelli di prevenzione è ancora molto severi. Come il primo punto nella rilevazione acida nucleica, nell'importanza della raccolta del campione e nella conservazione è oltre dubbio. L'industria di ispezione dice spesso «l'immondizia dentro, immondizia fuori (risultati dell'esemplare dell'immondizia)», la maggior parte del fattore importante sta provando. Se c'è un problema con la raccolta del campione, quindi il seguente lavoro è fatto bene ed i risultati sono invalidi. La scelta del tubo giusto della soluzione e della raccolta di conservazione del virus può fare la nuova rilevazione della corona ottenere due volte il risultato con la metà dello sforzo!
Attualmente, quasi tutte le soluzioni di conservazione del virus sul mercato direttamente conservare i virus in tensione, conducenti ad un ad alto rischio dell'infezione per il personale medico nel campionamento, nel trasporto e nelle prove. In considerazione di questa situazione, la prima linea di anti malattia epidemica ha bisogno della soluzione di conservazione del campione che può direttamente inattivare il virus. Tuttavia, dovrebbe essere notato che quando inattiva il virus, noi dovrebbe anche considerare se la soluzione di conservazione possa conservare stabile l'integrità dell'acido nucleico del virus per evitare la degradazione di acido nucleico nel campione prima di rilevazione, con conseguente «falso negativo» di rilevazione acida nucleica. Desheng non contiene soluzione di conservazione del virus del sale della guanidina per minimizzare il rischio «di falso negativo».
Abbiamo confrontato gli effetti della soluzione di conservazione che contengono il cloridrato della guanidina, l'isotiocianato della guanidina ed i preservativi senza sale della guanidina al ℃ 37. I risultati hanno indicato che la componente principale era sale della guanidina, l'effetto di conservazione non erano ideali!
Negli stessi stati di ℃ 37, l'efficienza di conservazione di acido nucleico virale è basicamente 100% dopo i 1-7 giorni di stoccaggio; tuttavia, l'efficienza di conservazione di acido nucleico virale diminuisce gradualmente con l'uso di altre due soluzioni di conservazione del sale della guanidina ed è più bassa di 20% entro il settimo giorno, indicante che il RNA sta subendo col passare del tempo la degradazione severa!
Il sale della guanidina (isotiocianato della guanidina o cloridrato della guanidina, ecc.) è un denaturante classico della proteina, che è usato spesso per lisi delle cellule nell'estrazione acida nucleica e può anche raggiungere l'effetto di inattivazione del virus. Tuttavia, il sale della guanidina non ha la capacità di conservare l'acido nucleico virale alla temperatura ambiente, che è facile da causare la degradazione del campione. Di conseguenza, non è adatto a conservazione di nuovi campioni del coronavirus. Di conseguenza, è raccomandato vivamente che scegliate non le componenti del sale della guanidina della soluzione di conservazione del virus.
Qui, facciamo appello a alla maggior parte dei lavoratori medici per prestare attenzione ai seguenti aspetti quando vi selezionano la soluzione di conservazione del virus se il vostro scopo di campionamento è rilevazione acida nucleica e non debba coltivare il virus in tensione:
1. La soluzione di conservazione del virus può essere usata per inattivare il virus
Attualmente, la rilevazione acida nucleica è di individuare il RNA virale nel campione, che deve spaccare il virus. Di conseguenza, finchè l'integrità e la stabilità dell'acido nucleico virale possono essere assicurate, non c'è necessità di conservare il virus in tensione. Di conseguenza, nella situazione attuale di combattimento contro la situazione epidemica del coronavirus nuovo, è più ideale inattivare il virus mentre raccoglie i campioni.
Alcuni produttori hanno introdotto la soluzione inattivata di conservazione sul mercato, ma la componente inattivata è sale della guanidina. I risultati degli esperimenti comparativi indicano che la soluzione di conservazione del sale della guanidina non ha la capacità di conservare l'acido nucleico del virus alla temperatura ambiente, che è facile da causare la degradazione del campione e non è adatta a conservazione di nuovi campioni del coronavirus. Di conseguenza, raccomandiamo la soluzione di conservazione del virus che contiene non il denaturante che della proteina del sale della guanidina può inattivare il virus ed assicurarsi che l'acido nucleico del virus non si degradi alla temperatura ambiente.
2. Il volume di soluzione di conservazione nella tubazione di presa dovrebbe essere appropriato
È molto importante selezionare il volume appropriato di soluzione di conservazione:① se ogni campione è provato esclusivamente, è raccomandato che selezioniate una tubazione di presa del virus con la soluzione di conservazione 1ml. Il volume di campionatura può non solo soddisfare le richieste dell'estrazione acida nucleica e della rilevazione nell'a valle, ma inoltre la concentrazione del virus è tre volte più superiore a quella della soluzione di conservazione 3ml! Il ② nel caso di selezione preliminare su grande scala e di rilevazione mista, i campioni del tampone di 3-5 persone è disposto nella stessa tubazione di presa. È raccomandato che selezioniate una tubazione di presa del virus con la soluzione di conservazione 3ml, di modo che la dimensione del campione può rispondere all'esigenza dell'estrazione acida nucleica a valle, migliorare l'efficienza di rilevazione e ridurre il costo di rilevazione.
3. Soluzione di conservazione del virus che può essere usata per trasportare ed immagazzinare i campioni alla temperatura ambiente
A causa dell'instabilità di RNA, la tubazione di presa tradizionale del virus deve essere trasportata al laboratorio in 48 ore nello stato di ℃ 4. Se la temperatura del trasporto non spetta al livello, può causare la degradazione dell'acido nucleico del virus e condurre al risultato dei test «del falso negativo»! Al contrario, se il kangweishiji può trasportare stabile e tenere l'acido nucleico del virus alla temperatura ambiente, il problema del trasporto del campione può essere risolto e l'accuratezza dei risultati di rilevazione può essere migliorata.
4. La soluzione di conservazione del virus che può proteggere il campione da inattivazione ad alta temperatura è usata
Secondo le linee guida pertinenti della Commissione nazionale di salute, i campioni dovrebbero essere inattivati a temperatura elevata (superiore a ℃ 56 per 30min) prima dell'estrazione dell'acido nucleico virale. Tuttavia, il centro di controllo delle malattie e la prevenzione di Pechino, il centro di ricerca di Pechino per medicina preventiva ed altre istituzioni sono dentro clinici la carta pubblicata da chimica hanno mostrato che l'inattivazione ad alta temperatura potrebbe condurre alla degradazione di acido nucleico virale, così la riduzione del tasso di rilevazione di acido nucleico virale, che era una delle ragioni per l'alto tasso del falso negativo di rilevazione acida nucleica di nuovo coronavirus.
I risultati hanno indicato che l'inattivazione ad alta temperatura non ha avuta effetto significativo sull'integrità dell'acido nucleico del coronavirus.
La soluzione di conservazione del virus si è sviluppata e prodotto da Desheng può essere divisa nei tipi inattivati e non inattivati. Le soluzioni differenti di conservazione sono selezionate secondo i requisiti e gli stati sperimentali differenti di rilevazione. Se avete qualunque domande o bisogni, chiamici prego per i dettagli. La scelta della soluzione di conservazione del virus di Desheng è la vostra giusta scelta.
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