Comparison of chemiluminescence and fluorescent substrates of HRP in enzyme-linked immunoassay

Il preparato enzimatico più comunemente usato nell'immunoassay legato all'enzima è la perossidasi del ravanello HRP.in particolare i substrati cromogenici qualiTOS, MAOS, e substrati fluorescenti. Substrati, substrati chimiluminescenti come il luminolo.che sta diventando sempre più popolare.

Indipendentemente dal fatto che si tratti di un substrato cromogeno, di un substrato fluorescente o di un substrato chimiluminescente, viene utilizzato come metodo di etichettatura e di rilevamento,che svolge un ruolo chiave nell'accuratezza e nella sensibilità del risultato di rilevamentoLa più diffusa è l'analisi dell'immunità da chemioluminescenza.

polvere di luminolo

Sviluppo di diversi substrati nelle prove biochimiche:

In termini di tempo di sviluppo del metodo di rilevamento, il substrato fluorescente è il prodotto della perossidasi sviluppato dopo il substrato cromogeno,e la sensibilità di rilevamento è superiore a quella del substrato cromogenicoSi possono utilizzare contemporaneamente diversi materiali fluorescenti di diversi colori. , ma l'apparecchiatura è costosa, il costo di rilevamento è elevato, ed è facilmente interferito dall'autofluorescenza generata dalle cellule o da altre molecole,ed è sensibile alla luce e instabile durante l'osservazione e la conservazioneDopo i substrati fluorescenti, la scoperta di substrati chimiluminescenti simili al luminolo ha portato i substrati HRP della perossidasi di rafano in uno stadio di rapido sviluppo.e vari substrati chimiluminescenti fortemente arricchiti di perossidasi di rafano Applicazioni.

La differenza tra chemioluminescenza e fluorescenza:

La chimioluminescenza è diversa dalla fluorescenza, il che significa che l'energia chimica generata nel processo di reazione chimica viene assorbita per stimolare le molecole ed emettere luce.La fluorescenza è la luce emessa dall'assorbimento dell'energia luminosa per eccitare le molecoleQuesta è la chemioluminescenza e la differenza nella fluorescenza sta nelle diverse forme di energia di eccitazione che formano molecole eccitate tra le due.uno è energia chimica e l'altro è energia luminosaIl rilevamento da chimioluminescenza ha un'elevata sensibilità e un basso livello di sfondo, per cui è ampiamente utilizzato.

Attualmente i substrati chimiluminescenti più comuni, inclusi i luminoli, i perossisosalati e gli esteri di acridina, sono diversi.reagenti chimiluminescentiSono comunemente utilizzati nell'analisi e nella determinazione chimica effettiva e sono utilizzati nell'analisi dei farmaci, nel monitoraggio ambientale, ecc. Il campo ha anche importanti applicazioni.I suddetti reagenti chimioluminescenti sono prodotti appositamente dalla Desheng, ma va notato che gli esteri di acridina possono emettere luce direttamente e non richiedono la catalisi enzimatica.