La CLIA è nata nel 1977, secondo il principio di base del radioimmunoassay.l' immunoassay di chemioluminescenza è stato stabilito combinando la tecnologia di chimioluminescenza ad alta sensibilità con una risposta immunitaria ad alta specificitàIl CLIA ha i vantaggi di un'alta sensibilità, una forte specificità, un ampio raggio lineare, un funzionamento semplice e la mancanza di attrezzature costose.
La CLIA è ampiamente utilizzata per il rilevamento di antigeni, apteni e anticorpi di diverse dimensioni molecolari, nonché di sonde per acidi nucleici.La CLIA ha i vantaggi di non essere irradiata, lungo periodo di validità e completa automazione.
L'immunoassay chimiluminescente consiste in due sistemi: immunoassay e analisi chimiluminescente.che sono direttamente etichettati sull'antigene o sull'anticorpoDopo la reazione dell'antigene e dell'anticorpo, si forma un complesso immunitario dell'anticorpo dell'antigene.
Il sistema di analisi della chimioluminescenza è dopo la fine della reazione immunitaria, aggiungere un ossidante o un substrato luminescente enzimatico, materiale di chimioluminescenza dopo l'ossidazione da parte dell'ossidante,formano un intermedio in stato eccitato, emetterà fotoni per rilasciare energia per tornare allo stato di base stabile, l'intensità luminosa può essere rilevata da uno strumento di misura del segnale luminoso.Secondo la relazione tra i marcatori chemioluminescenti e l'intensità luminosa, il contenuto della sostanza misurata può essere calcolato con una curva standard.
L'immunoassay chimiluminescente (CLIA) è un tipo di metodo di immunoassay che utilizza un agente chimiluminescente per etichettare direttamente anticorpi o antigeni.Gli esteri di luminolo e acridina sono gli agenti chimiluminescenti più comuni.
1 immunoassaggio per chemioluminescenza del luminolo: il luminolo è una reazione ossidativa. Il luminolo può essere ossidato da molti ossidanti in soluzione alcalina, tra cui H2O2 è il più comunemente usato.A causa della lenta velocità di reazioneGli enzimi principali sono la perossidasi del rafano (HRP), e quelli inorganici includono O3, alogeno, Fe3, Cu2, CO2 e i loro complessi.
Nella fase iniziale è stato utilizzato principalmente per la determinazione di piccole molecole biologiche inorganiche e organiche,e la sensibilità diminuita a causa della diminuzione dell'intensità luminosa dopo l'etichettaturaÈ stato riscontrato che l'aggiunta di alcuni fenoli e dei loro derivati, di amine e dei loro derivati e di derivati dell'acido fenilboronico può migliorare significativamente la luminescenza del sistema.L'intensità della luminescenza può essere aumentata di 1000 volte, e la luminescenza di "sfondo" è significativamente ridotta e il tempo di luminescenza è anche prolungato.L' uso di questi potenziatori rende l' immunoassay chimiluminescente ampiamente utilizzato nell' analisi delle proteine e degli acidi nucleici..
2 estere di acridina etichettato con immunoassay di chimiluminescenza:estere di acridinaA causa della sua scarsa stabilità termica, sono stati sintetizzati derivati più stabili dell'ester di acridina.gli esteri di acridina possono emettere luce rapidamente con un elevato rendimento quantisticoAd esempio, il rendimento quantistico degli esteri aromatici di acridina può raggiungere 0.05Quando gli esteri di acridina vengono utilizzati come marcatori per l'immunoassay, il sistema di luminescenza è semplice, rapido e non richiede l'aggiunta di catalizzatori.l'efficienza dell'etichettatura è elevata e lo sfondo è bassoQueste caratteristiche suscitano il grande interesse della maggior parte degli operatori di analisi e diagnostica.
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