Immunotest per chemioluminescenza e dosagggio immunologico di fluorescenza

Nel campo della diagnostica in vitro, sia l'analisi immunologica per chimioluminescenza CLIA che l'analisi immunofluorescente IFA sono metodi di rilevamento comunemente utilizzati,e alla fine entrambi sono rilevati da un fotometro, ma i principi dei due sono essenzialmente diversi.

Rispetto all'immunoassay radioimmunologico, all'immunoassay fluorescente e all'immunoassay associato agli enzimi, l'immunoassay chemioluminescente presenta maggiori vantaggi:forte specificitàInoltre, il marcatore è privo di radiazioni, ha un lungo periodo di validità e può essere completamente automatizzato.

Reagente di chimioluminescenza acridinio estere

La differenza tra immunità da chemioluminescenza e immunità da fluorescenza:

Sebbene entrambe siano reazioni di luminescenza, la differenza più intuitiva è che la chemiluminescenza è la propria luminescenza del reagente,mentre la fluorescenza è irradiata con una fonte di luce (di solito ultravioletta) e poi emette luceIl principio di emissione della luce dei due è diverso, quindi i risultati di rilevamento saranno anche diversi.

La chimioluminescenza è l'uso dell'energia generata da una reazione chimica per indurre transizioni di livello energetico per emettere luce, come il luminolo che rileva macchie di sangue;la fluorescenza è un fenomeno di fotoluminescenza, e deve essere fornita una sorgente luminosa per eccitare le molecole per produrre transizioni di livello energetico e quindi emettere luce.

La chemioluminescenza è meno interferente dell' immunità fluorescente:

Quando questi due metodi sono utilizzati per l'immunoassay, la differenza è evidente: la chemioluminescenza non richiede una fonte luminosa esterna e l'interferenza di sfondo è piccola;mentre la fluorescenza richiede una fonte di luce esternaQuando viene rilevato nella direzione della sorgente luminosa verticale, vengono rilevate anche le proteine, gli amminoacidi e altre molecole presenti nel campione biologico.e lo sfondo è leggermente più altoÈ necessario selezionare reagenti fluorescenti e metodi di trattamento dei campioni appropriati per ridurre l'influenza dell'assorbimento non specifico delle proteine.

Nel metodo diretto, l'anticorpo di ciascun antigene deve essere etichettato in modo fluorescente, e quello etichettato in modo fluorescente può influenzare il titolo dell'anticorpo o addirittura diventare invalido.Il metodo indiretto richiede solo di produrre l' anticorpo corrispondente all' antigene corrispondenteNon è necessario etichettare fluorescente per ogni anticorpo, e ha poco effetto sul titolo dell'anticorpo primario.L'interferenza chimioluminescente è molto piccola e la specificità è molto elevataL'uso dell'intero metodo è limitato dalla non specificità dell'analisi chimica stessa.Lo sviluppo dei materiali per perline magnetiche ha reso lo sviluppo della tecnologia della chemioluminescenza sempre più maturo.

Per quanto riguarda lo sviluppo di reagenti di diagnostica in vitro, Desheng ha ottenuto successi sia nei reagenti di immunoassay legati agli enzimi sia nei reagenti di chemioluminescenza. Luminolo e isoluminolo sono tutti reagenti necessari negli immunoassaggi di chemioluminescenza. .