TES tampone biologico: il "Guardiano stabile" nella precipitazione e estrazione del DNA

In esperimenti di biologia molecolare, la precipitazione e l'estrazione del DNA sono passi fondamentali nella ricerca genetica, nella tecnologia di clonazione e nello sviluppo di reagenti diagnostici.la selezione diagenti di tamponamento biologiciinfluenza direttamente la purezza, l'integrità e l'efficienza sperimentale del DNA.Acido trimetilmetilaminoetanosulfonico (TES buffer), come agente tampone efficiente, ha dimostrato vantaggi significativi nel campo della manipolazione del DNA grazie alle sue proprietà fisico-chimiche uniche e alla sua stabilità.

Le proprietà chimiche del TES: base scientifica per la capacità di tamponamento

TES, il nome chimico è acido 2-[triidrossimetil]-metilamino]-1-etanosulfonico,e i gruppi di acido sulfonico e i gruppi idrossili multipli nella sua struttura molecolare gli conferiscono un'eccellente capacità di tamponamentoA temperatura ambiente, il valore di pKa di TES è 7.5, e l'intervallo di tamponamento efficace copre il pH 6,8-8.2, che corrisponde con precisione ai requisiti di attività e stabilità del DNA della maggior parte degli enzimi biologici.Il TES mostra una maggiore resistenza ai cambiamenti di temperatura e può efficacemente evitare il rischio di degradazione del DNA indotta da basse temperature.

Il triplice ruolo centrale nell'estrazione del DNA

1. Lisi cellulare e rimozione delle proteine

Durante lo stadio di lisi cellulare, il TES inibisce l'attività degli enzimi del DNA e protegge il DNA genomico dalla degradazione chelatando gli ioni metallici bivalenti (come Mg 2 +, Ca 2 +) nella soluzione.Il suo sistema tampone mantiene simultaneamente il pH ottimale per le proteasi come la proteasi K (di solito pH 7.5-8.0), accelerando la degradazione delle membrane cellulari e la degradazione delle proteine.Gli esperimenti hanno dimostrato che l'efficienza di rimozione delle proteine del sistema di lisi con tampone TES è migliorata di circa il 25% rispetto ai metodi tradizionali, ponendo una buona base per le fasi successive di depurazione.

2- regolazione selettiva della precipitazione del DNA

TES è una soluzione tampone composita composta da acido cloridrico Tris, EDTA e SDS (TES-EDTA-SDS), che ottiene la precipitazione selettiva del DNA regolando la resistenza ionica della soluzione.A concentrazioni elevate di sale (come 2.5M NaCl), i gruppi di acido solfonico del TES agiscono attraverso schermatura elettrostatica, favorendo la repulsione dei gruppi fosfatici tra le molecole di DNA e formando uno stato solubile;Quando la concentrazione di sale scende al di sotto di 0.5M, aggregati e precipitati di DNA dovuti all'esposizione della colonna vertebrale fosfato. Questo processo ha un effetto repulsivo sull'RNA e altre impurità, con conseguente purezza di recupero del DNA superiore al 95%.

3Protezione dell' attività enzimatica

L' effetto protettivo del tampone TES sull' attività enzimatica è particolarmente evidente nel limitare le reazioni di scissione enzimatica.La ricerca ha dimostrato che l'efficienza di taglio degli enzimi di restrizione (come EcoRI) utilizzando il sistema di reazione TES è superiore del 18% -22% a quella del tampone HEPESIl suo ambiente pH stabile riduce i cambiamenti di conformazione enzimatica, prolunga il periodo lineare delle reazioni di scissione enzimatica e garantisce l'accuratezza degli esperimenti di modifica genetica.

Conclusioni

Il tampone TES presenta vantaggi insostituibili nella precipitazione e estrazione del DNA a causa della sua eccellente stabilità del pH, delle proprietà di chelazione degli ioni metallici e dell'effetto di protezione enzimatica.Ottimizzando le condizioni sperimentali ed esplorando nuovi scenari di applicazione, TES continuerà a guidare la ricerca in biologia molecolare verso direzioni più efficienti e precise.La padronanza del meccanismo di buffering e delle tecniche di applicazione del TES è senza dubbio la chiave per migliorare il tasso di successo degli esperimenti.

Il tampone TES non è utilizzato solo in cosmetici, ma le sue proprietà di tampone lo rendono un importante fattore nell'analisi delle proteine, nella determinazione dell'attività enzimatica e nella coltura cellulare.TES buffer, Desheng può fornire alta purezza e diversi tipi di materie prime tampone. I clienti possono completare l'approvvigionamento one-stop, risparmiando tempo e costi.Si sentano liberi di contattarci per l'acquisto in qualsiasi momento!