Applicazione di CAPS (CAS 1135-40-6) nell'esperimento del Transmembrane della proteina

Introduzione

CAPS, 3 (cicloesilammina) - 1-propanesulfonic acido, un prodotto chimico organico, polvere cristallina bianca, CAS1135-40-6, è un amplificatore biologico, comunemente usati nei corredi diagnostici biochimici dell'estrazione di DNA/RNA, dei corredi e corredi in sistema diagnostico di PCR. L'amplificatore per chimica degli enzimi e la separazione di HPLC di droghe di base è ampiamente usato nel processo di trasferimento della membrana di ordinamento dei proteus. CAPS attenua è composto di CAPS, di acqua deionizzata, ecc. ed il suo pH è registrato a 11,0 per ottenere il fibronectin del purificationof.

CAPS attenua

Punti chiave dell'operazione

1. Elettroforesi di SDS-PAGE: secondo le circostanze convenzionali (sistema di CAPS: per > = proteina 20kD; Sistema di Tris Tricine: per proteina a basso peso molecolare, anche per la proteina di alto peso molecolare);

2. Concentrazione nel metanolo: la gamma di concentrazione nel metanolo nell'amplificatore electroimprinting di CAPS è 0-20% (la concentrazione nel metanolo è alta, usato per il trasferimento a basso peso molecolare della proteina; la concentrazione nel metanolo è bassa o persino non contiene il metanolo, usato per il trasferimento della proteina di alto peso molecolare);

trattamento della membrana 3.PVDF: elimini la membrana di PVDF, inzuppila in metanolo per parecchi secondi e poi mettala nell'amplificatore electroblotting di CAPS. (Nota: la membrana di PVDF sarà impedita inaridire dopo l'operazione. Se la membrana è asciutta, ripeti l'operazione di questo punto);

4. Trattamento del gel: rimuova il gel del gel ed inzuppi nell'amplificatore di CAPS per 5-10 minuti. (Nota: questo punto può essere omesso quando trasferisce alcune forti proteine di base pi > 9,0);

5. Installi la scanalatura di trasferimento: immerga la carta da filtro e la spugna nell'elettro amplificatore macchiante, quindi premi il panino di stampa elettrico per la spugna, la carta da filtro, il film di PVDF, il gel, la carta da filtro e la spugna e mettalo in una piccola scanalatura rotatoria elettrica.

6. Stati di trasferimento: trasferimento 50V a pressione costante (100-170 mA) alla temperatura ambiente per 0.5-2h. (Nota: vuoti le bolle fra il gel ed il film di PVDF. Per esempio, la proteina superiore a 70 KD dovrebbe essere trasferita per tempo maggiore);

7. Pretrattamento di tintura della membrana di PVDF: elimini la membrana di PVDF e risciacquila con acqua deionizzata, inzuppila in metanolo per parecchi secondi, quindi tingala;

8. Tintura della membrana: Blu brillante di Coomassie che tinge (dissolva 0,1% blu brillanti R-250 di Coomassie in acido acetico di 40% methanol/1%) per 30-50 secondi (non più di 1 minuto), decolorando con il metanolo di 50% (soluzione di decolorazione del cambiamento frequentemente), lavante con acqua deionizzata completamente e poi asciugantesi;

Preparazione di CAPSbuffer

1. 10×CAPS (100mmol/L) la soluzione tampone è preparata come segue: CAPS, 22.13g; aggiunga l'acqua deionizzata a 900ml; regoli il pH a 11,0 con NaOH 2mol/L (circa 20ml), quindi diluisca a 1L ed immagazzini a 4℃.

2. L'amplificatore electroimprinting di CAPS (1×CAPS che contiene il metanolo di 10%) è preparato con i seguenti metodi: 200ml 10 di × CAPS; 200ml di metanolo; 1600ml di acqua deionizzata.

Altre applicazioni

CAPS inoltre è usato per fabbricare i materiali di saldatura, l'impianto di condizionamento d'aria e le materie prime per fabbricare; inoltre è usato per fabbricare la pirotecnica; è usato come reagente analitico, trasportatore di scambio termico ed inoltre è utilizzato nell'industria farmaceutica; è usato per condizionamento d'aria, la pirotecnica, batterie a secco; inoltre è usato come cambiamento continuo e diseccante; è utilizzato per l'agente indurente di isocianato acquoso nell'industria delle vernici. La società di Desheng si specializza nella R & S e nella produzione di vari amplificatori biologici, compreso CAPS, Tris, Bicine, le ZAZZERE, ecc., con il ≥ 99% di elevata purezza, il processo stabile, le imprese benvenute e gli individui ad ulteriore consultazione.