Applicazione di CAPS (CAS 1135-40-6) nell'esperimento del Transmembrane della proteina

Introduzione

Capitali, l' acido 3- ((cicloessilammina) 1-propanesulfonico, una sostanza chimica organica, polvere cristallina bianca, CAS1135-40-6, è un tampone biologico, comunemente utilizzato nei kit di diagnostica biochimica,Kit di estrazione di DNA/RNA e kit diagnostici PCRIl tampone per la chimica enzimatica e la separazione HPLC dei farmaci di base è ampiamente utilizzato nel processo di trasferimento a membrana del sequenziamento delle proteine.Capitaliil tampone è composto da:CapitaliL'acidità di fibronectina è calcolata in base al pH di un liquido, acqua deionizzata, ecc., e il suo pH è regolato a 11,0 per la depurazione della fibronectina.

Bilancio di attività

Punti chiave di operatività

1. SDS-PAGE elettroforesi: secondo le condizioni convenzionali (sistema CAPS: per > = 20kD proteine; sistema Tris Tricine: per proteine a basso peso molecolare, anche per proteine ad alto peso molecolare);

2. concentrazione di metanolo: l'intervallo di concentrazione di metanolo nel tampone di elettromaterializzazione CAPS è compreso tra lo 0 e il 20% (la concentrazione di metanolo è elevata, utilizzata per il trasferimento di proteine a basso peso molecolare;la concentrazione di metanolo è bassa o non contiene nemmeno metanolo, utilizzato per il trasferimento di proteine ad alto peso molecolare);

3Trattamento della membrana PVDF: estrarre la membrana PVDF, immergerla in metanolo per diversi secondi e poi inserirla nel tampone di elettrobottamento CAPS (Nota:la membrana PVDF deve essere tenuta a secco dopo il funzionamentoSe la membrana è asciutta, ripetere l'operazione di questo passaggio);

4. Trattamento con gel: rimuovere il gel gel e immergerlo in tampone CAPS per 5-10 minuti. (Nota: questo passaggio può essere omesso quando si trasferiscono alcune proteine basiche forti PI > 9.0);

5. Installare lo slot di trasferimento: immergere la carta filtrabile e la spugna nel tampone elettro blotting, quindi premere il panino di stampa elettrica in ordine spugna, carta filtrabile, pellicola PVDF, gel,carta filtrabile e spugna, e metterlo in un piccolo slot elettrico rotativo.

6Condizioni di trasferimento: trasferimento a pressione costante di 50 V (100-170 MA) a temperatura ambiente per 0,5 - 2 ore.la proteina superiore a 70 KD deve essere trasferita per più tempo);

7. Pre-trattamento della tintura della membrana PVDF: estrarre la membrana PVDF e sciacquarla con acqua deionizzata, immergerla per diversi secondi in metanolo, quindi tingerla;

8. tintura a membrana: tintura blu brillante Coomassie (soluzione di 0,1% di R-250 blu brillante Coomassie in 40% di metanolo/1% di acido acetico) per 30-50 secondi (non più di 1 minuto),decolorante con metanolo al 50% (cambiare frequentemente la soluzione decolorante), lavare completamente con acqua deionizzata e poi asciugare;

CAPS preparazione del tampone

1. 10×CAPS(100 mmol/L) soluzione tampone viene preparata come segue: CAPS, 22,13 g; aggiungere acqua deionizzata a 900 ml; regolare il valore del pH a 11,0 con 2 mol/L NaOH (circa 20 ml), quindi diluire a 1L e conservare a 4°C.

2. Il tampone di elettromaterializzazione CAPS (1 × CAPS contenente 10% di metanolo) è preparato con i seguenti metodi: 200 ml di 10 × CAPS; 200 ml di metanolo; 1600 ml di acqua deionizzata.

Altre applicazioni

Capitaliè utilizzato anche per la fabbricazione di materiali di saldatura, apparecchiature per il condizionamento dell'aria e materie prime per la produzione; è utilizzato anche per la fabbricazione di prodotti pirotecnici; è utilizzato come reagente analitico,portatore di scambi di calore, e utilizzato anche nell'industria farmaceutica; viene utilizzato per l'aria condizionata, la pirotecnia, le batterie a secco; viene utilizzato anche come fluido e essiccante;viene utilizzato per l'agente di purificazione dell'isocianato acquoso nell'industria della verniciaturaLa società Desheng è specializzata nella ricerca e sviluppo e nella produzione di vari tamponi biologici, tra cui CAPS, Tris, Bicine, MOPS, ecc., con alta purezza ≥ 99%, processo stabile,accogliere le imprese e gli individui per ulteriori consultazioni.