Applicazione dell'estere di acridinium nella determinazione del DNA

I derivati degli esteri di acridina sono una classe direagenti per la chemioluminescenzaA causa dei loro bassi requisiti per l'iniziatore, del basso background e del basso rumore, e dell'elevata sensibilità durante il processo di luminescenza, sono spesso utilizzati negli immunoassay clinici.Può essere utilizzato come sonda molecolare per l'acido nucleico per misurare l'attività di enzimi biologici o per altre applicazioni. Può etichettare gli anticorpi ed è ampiamente utilizzato negli immunoassays. Tali composti possono produrre rapidamente la chemioluminescenza in presenza di perossido di idrogeno e hanno un'elevata efficienza di chemioluminescenza.Inoltre, poiché gli esteri di acridina hanno una struttura simile agli esteri di acetofenone e hanno un singolo legame esterico, la sensibilità di rilevamento è elevata, quindi possono essere utilizzati per il rilevamento dell'attività enzimatica.

Come reagente chimiluminescente efficiente, l' estere di acridinio ha una vasta gamma di applicazioni nell' immunoassay clinico, nell' analisi del DNA, nella determinazione dell' attività enzimatica biologica, ecc.Questo articolo si concentra sull'applicazione degli esteri di acridina nella determinazione del DNAGli esteri di acridinio possono essere utilizzati per test genetici o test microbici in termini di DNA.

Applicazione dell'estere di acridinio nella determinazione del DNA:

Gli esteri di acridina possono essere utilizzati per etichettare le sonde di frammenti di oligonucleotidi per analisi genetiche o microbiche.I composti esterici di acridina sono molto adatti per etichettare i fili di DNA per produrre sonde di DNA chimiluminescentiI risultati della ricerca medica moderna mostrano che molte malattie come il cancro e le malattie genetiche sono correlate a mutazioni del DNA, e molte malattie infettive sono causate da virus,batteri o parassiti nell'ambienteL'analisi della sequenza specifica del DNA dei virus è utile per il controllo dell'epidemia.,diagnosi precoce e trattamento delle malattie genetiche e determinazione dei geni patogeni.

Nell'analisi dell'ibridazione degli acidi nucleici, la preparazione di sonde etichettate con una forte specificità e alta sensibilità è la chiave per un'analisi di ibridazione di acidi nucleici di successo.I derivati di esteri di acridinio possono essere etichettati direttamente su sonde di acidi nucleici senza la necessità di catalizzatori e il rendimento quantico di luminescenza non è influenzatoInoltre, in determinate condizioni, l'ester di acridinio etichettato sul DNA monofilato non ibrido viene idrolizzato e distrutto,e solo l' estere di acridinio protetto a doppio filamento formato dall' ibridazione può produrre chemioluminescenza, e l'intero processo di ibridazione può essere monitorato senza separazione.

Sulla base di questo principio, alcuni ricercatori hanno stabilito un nuovo metodo di microarray genetico per il rilevamento della protezione dell'ibridazione dell'aldeide disidrogenasi e del gene ApoE correlato al morbo di Alzheimer.Questo metodo ha progettato due sonde di DNA etichettate con biotina per rilevare il polimorfismo del sito A/G dell'aldeide desidrogenasi, e tre sonde di DNA etichettate con biotina sono state utilizzate per rilevare C/T in due siti di polimorfismo ApoE, etichettare l' estere di acridinio nel sito di mutazione,e poi fissare la sonda del DNA sulla piastra microtiter rivestita con streptavidinSolo quando il DNA bersaglio e il DNA della sonda sono completamente abbinati, l'acridina può essere garantita.e i geni dell'aldeide deidrogenasi e dell'ApoE possono essere determinati in base alla presenza o all'assenza di chemioluminescenzaWang Xiaojuan ed altri hanno usato l'estere di acridina come indicatore di chemioluminescenza incorporato nella struttura della doppia elica del DNA e hanno usato 0,1 mol/LHNO3 e 3%H2O2 oltre a 0.3mol/LNaOH più 2%TritonX-100 come reagente di partenza della luminescenzaUn nuovo metodo per l'analisi chimioluminescente del danno da rottura del DNA.

I risultati hanno mostrato che una bassa concentrazione di formaldeide causava danni alla rottura del DNA, un'alta concentrazione di formaldeide causava il collegamento incrociato del filamento del DNA,e l' acetaldeide ha causato solo danni alla rottura del filamento del DNAAllo stesso tempo, sono stati studiati il comportamento dannoso e i possibili meccanismi della formaldeide e dell'acetaldeide nel DNA.Gli esteri di acridina sono utilizzati anche come sonde del DNA per la determinazione del DNA di HBV e HIV di tipo I e II, sonde per oligonucleotidi del DNA HIV-I per la determinazione del gene della gag e per gli immunoassay, sonde per oligonucleotidi del DNA per la determinazione della mutazione del gene della fibrosi cistica ΔF508, ΔI507 ecc.

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