Un'applicazione dell'acido ethanesulfonic di hydroxyethylpiperazine 4 (HEPES) nella rilevazione del virus della rabbia

4-Hydroxyethylpiperazine acido ethanesulfonic, abbreviazione inglese HEPES, numero di CAS: 7365-45-9, il colore è polvere cristallina bianca, la gamma di pH è 6.8-8.2, la sua applicazione più comune è come pH biologico di adeguamento dell'amplificatore e la sua applicazione nei prodotti di cura di pelle inoltre è amata dai produttori importanti. La sua applicazione nella rilevazione del virus della rabbia è spesso sconosciuta. Oggi, il redattore di Desheng diffonderà la conoscenza pertinente per ognuno.

Il virus della rabbia non produce generalmente citopatico (CBE) quando si riproduce in cellule infettate e non è facile da formare le placche negli stati convenzionali della cultura. Sebbene molti studiosi nel paese ed all'estero abbiano stabilito l'erosione del virus della rabbia sulle cellule dell'embrione del pollo e sulle cellule BHK-21. I metodi del punto, ma questi metodi richiedono le circostanze sperimentali rigorose, o le operazioni sono complicate e difficili da padroneggiare, che colpisce la loro divulgazione ed uso. Dopo che i ricercatori hanno trovato che 4 il hydroxyethylpiperazine HEPES acido ethanesulfonic può migliorare l'effetto patogeno del virus della rabbia sulle cellule infettate, hanno usato questa caratteristica di HEPES per stabilire un metodo semplice e rapido della placca di HEPES per il virus della rabbia.

L'effetto di HEPES sulla formazione di placca del virus della rabbia

Dopo che le cellule infettate sono state coltivate a 37°C per i 3 - 5 giorni, le cellule infettate trattate con HEPES hanno sviluppato i cambiamenti citopatici ovvi al fondo della copertura. Dopo la macchiatura con la viola di cristallo, la chiara formazione di placche è stata veduta, mentre il gruppo infettato delle cellule non trattato con HEPES non ha mostrato segni della formazione di placche. Non c'è effetto citopatico e nessuna formazione di placche. Può essere visto che HEPES può promuovere ovviamente la formazione di placca del virus della rabbia sulle cellule di BHK.

Osservazione sulla sensibilità del metodo della placca di HEPES

Il metodo della placca di HEPES può essere usato per il titolo di infezione virale. Gli esperimenti indicano che c'è una relazione ovvia di titolo fra il numero delle placche formate dopo infezione virale e la diluizione del virus. I titoli infettivi dello stesso sforzo del virus della rabbia CTN-BHK sono stati misurati con il metodo della placca di HEPES ed il metodo del topo. I risultati hanno indicato che il numero delle placche ottenute con il metodo della placca di HEPES per le 4 determinazioni consecutive ha variato da 1.0×10° a 4.0× 10*PFU/m1. Il titolo di infezione ottenuto con il metodo del topo per le 4 determinazioni consecutive è 6.0~6.8log o 1.0×10°~6.3×10/ml. Ciò indica che il metodo rapido della placca di HEPES ha la stessa sensibilità del metodo del topo.

Vantaggi del metodo della placca di HEPES

Facendo uso di sforzo del virus della rabbia CTN-181 e di sforzo di CTN-BNK per studiare il metodo della titolazione di titolo di infezione, i risultati indicano che HEPES può indurre e migliorare l'effetto patogeno del virus canino sulle cellule infettate. Quando il virus infetta le cellule, sono coltivate appena a 37°C per 3~5 per aggiungere 50~00mmol/L HEPES sulla copertura del medium semisolido il primo giorno, macchia della metilcellulosa con la soluzione viola di cristallo dopo 24 ore e calcolano il numero delle placche dagli occhi nudi dopo l'essiccamento alla temperatura ambiente. Rispetto al metodo del punto dell'insetto riferito nella letteratura precedente, questo metodo della placca presenta i vantaggi di veloce, di semplice, di economico, di sensibile e di facile padroneggiare.

Il HEPES prodotto da Desheng è grado del reagente con una purezza maggior di 99%. I nostri prodotti eseguono bene. Ci sono molti produttori cooperativi e possono fornire i campioni gratis di prova. Desheng continuerà a fornire ai clienti i prodotti di alta qualità come sempre. Se avete qualunque domande o bisogni, potete andare al sito Web ufficiale consultare il personale di servizio di assistenza al cliente