Un'applicazione dell'acido ethanesulfonic di hydroxyethylpiperazine 4 (HEPES) nella rilevazione del virus della rabbia

Acido etanosulfonico 4-idrossietilpiperazina, abbreviazione in ingleseBuffer HEPES, numero CAS: 7365-45-9, colore polvere cristallina bianca, pH 6,8-8.2, la sua applicazione più comune è come valore di pH di regolazione del tampone biologico e la sua applicazione nei prodotti per la cura della pelle è anche amata dai principali produttori.La sua applicazione nel rilevamento del virus della rabbia è spesso sconosciutaOggi, l'editore di Desheng pubblicherà conoscenze rilevanti per tutti.

Il virus della rabbia generalmente non produce citopatia (CPE) quando si riproduce nelle cellule infette e non è facile formare placche in condizioni di coltura convenzionali.Sebbene molti studiosi in patria e all' estero abbiano stabilito l' erosione del virus della rabbia sulle cellule embrionali di pollo e sulle cellule BHK-21. metodi spot, ma questi metodi richiedono condizioni sperimentali rigorose, o le operazioni sono complicate e difficili da padroneggiare, il che incide sulla loro divulgazione e utilizzo.Dopo che i ricercatori hanno scoperto che l'acido etanesulfonico 4-idrossietilipiperazina HEPES può aumentare l'effetto patogeno del virus della rabbia sulle cellule infette, hanno utilizzato questa caratteristica dell'HEPES per stabilire un metodo semplice e rapido per la formazione della placca HEPES per il virus della rabbia.

L' effetto dell' HEPES sulla formazione della placca del virus della rabbia

Dopo che le cellule infette sono state coltivate a 37°C per 3-5 giorni, le cellule infette trattate con HEPES hanno sviluppato evidenti cambiamenti citopatici nella parte inferiore del rivestimento.Dopo la colorazione con cristallo violaNel gruppo delle cellule infette non trattate con HEPES non sono stati osservati segni di formazione di placca.Si può vedere che l' HEPES può evidentemente promuovere la formazione di placche del virus della rabbia sulle cellule BHK..

Osservazione sulla sensibilità del metodo HEPES per la placca

Il metodo HEPES può essere utilizzato per il titolo dell' infezione da virus.Gli esperimenti dimostrano che esiste un' ovvia relazione di titolo tra il numero di placche formate dopo l' infezione da virus e la diluizione del virusI titoli infettivi dello stesso ceppo del virus della rabbia CTN-BHK sono stati misurati con il metodo della placca HEPES e con il metodo del topo.I risultati hanno mostrato che il numero di placche ottenute con il metodo HEPES per 4 determinazioni consecutive variava da 1 a 10 per 100 pazienti..0×10° a 4.0×10*PFU/m1. Il titolo di infezione ottenuto con il metodo del topo per 4 determinazioni consecutive è di 6,0×6,8log o 1,0×10°×6,3×10/ml.Ciò dimostra che il metodo HEPES rapido per la placca ha la stessa sensibilità del metodo del topo..

Vantaggi del metodo HEPES

Utilizzando il ceppo del virus della rabbia CTN-181 e il ceppo CTN-BNK per studiare il metodo di titolazione del titolo di infezione,i risultati mostrano che l'HEPES può indurre e rafforzare l'effetto patogeno del virus canino sulle cellule infetteQuando il virus infetta le cellule, vengono coltivate a 37°C per 3°5 Aggiungi 50°00mmol/L di HEPES sul coperchio di un mezzo semi-solido di metilcellulosa il primo giorno,macchia con soluzione cristallina viola dopo 24 ore, e calcolare il numero di placche ad occhio nudo dopo l'essiccazione a temperatura ambiente.Questo metodo di placca ha i vantaggi di una rapida, semplice, economico, sensibile e facile da padroneggiare.

L'HEPES prodotto da Desheng è di grado reagente con una purezza superiore al 99%.DeshengContinueremo a fornire ai clienti prodotti di alta qualità come sempre.