L'estere dell'acridina può individuare il danno del DNA causato da formaldeide e da acetaldeide!

I vari fattori esogeni ed endogeni, quali gli agenti inquinanti ambientali, radiazione ionizzante, la chemioterapia della droga e metabolismo delle cellule, possono causare le varie forme di danno del DNA. Fra loro, le rotture del doppio filo del DNA hanno la maggior parte del serio danno alla stabilità del genoma e possono minacciare la sopravvivenza delle cellule. Stabilendo un semplice, il metodo rapido e sensibile per la rilevazione degli effetti di ibridazione e della genotossicità del DNA è un argomento di ricerca molto significativo. Qui è una breve introduzione al metodo di rilevazione di danno del DNA.

Che cosa sono i tipi di rilevazioni di danno del DNA

I metodi di rilevazione di danno del DNA comprendono la spettrofotometria ultravioletta dell'elettroforesi del gel, la fluorescenza e l'elettrochimica e l'analisi di chemiluminescenza. L'analisi di chemiluminescenza (CL) è stata ampiamente usata nei campi dell'ambiente e delle scienze biologiche dovuto la suoi alta sensibilità, ampio cammino lineare, operazione conveniente, analisi veloce e automazione facile. La formaldeide e l'acetaldeide sono entrambi gli agenti inquinanti ambientali. Fino ad un certo punto, può causare il danno del DNA. Studi la quantità di esteri di acridinium incastonati in DNA prima e dopo il danno di formaldeide e di acetaldeide, causante i cambiamenti nell'intensità di chemiluminescenza degli esteri di acridinium e studi il comportamento di danno di formaldeide e di acetaldeide su DNA. Stabilisca un metodo di analisi semplice di chemiluminescenza per valutare il grado di danno del DNA causato da formaldeide e da acetaldeide.

Metodo degli esteri dell'acridina per la rilevazione del danno ambientale a DNA

1. In primo luogo, inzuppi la cellula di vetro di luminescenza utilizzata in una certa quantità di acido nitrico concentrato per parecchie ore, acidifichi e poi risciacqui con acqua. Aggiunga il μL 20 del DNA del timo del vitello 1mg/mL alla cellula acidificata di luminescenza e dispongalo affinchè 1 ora preparino Il DNA è adsorbito sul fondo dello stagno luminescente e poi il vitello unadsorbed il DNA del timo che è lavato con acqua secondaria per ottenere lo stagno luminescente con DNA ha adsorbito.

2. Aggiunga 50μL dell'estere di acridinium 9.6×10-7g/mL alla cellula luminescente e la reazione di chimerization è affinchè 1h incastoni gli EA nella struttura a doppia elica del DNA e lava via gli EA unchimeric con acqua secondaria. Per concludere, nella cellula luminescente aggiunga nell'ordine i reagenti di inizio di luminescenza per individuare la chemiluminescenza generata dagli EA chimerized in DNA. Nell'individuare il danno del DNA del timo del vitello dalla formaldeide e dall'acetaldeide, aggiunga il reagente di danno al DNA dopo il chimerization degli EA ed usilo dopo un determinato periodo. La seconda acqua lava via gli EA liberati dopo che il DNA è danneggiato ed il reagente di inizio di luminescenza si aggiunge per individuare l'intensità di chemiluminescenza degli EA chimerici nel DNA.

Gli studi hanno indicato che l'estere di acridinium può essere usato come indicatore di chemiluminescenza con una buona struttura di intercalare la doppia elica del DNA. Questo metodo di rilevazione è fattibile per danno della rottura del DNA ed il metodo di rivelazione per chemioluminescenza. Presenta i vantaggi di semplicità e della sensibilità. Gli studi di danno forniscono un metodo semplice della ricerca. Gli indicatori luminescenti dell'estere dell'acridina di Desheng hanno le proprietà di buona stabilità idrolitica, della stabilità termica e di alto rapporto segnale-rumore e le circostanze d'etichettatura sono delicate, il tasso d'etichettatura è alto e la separazione non colpisce la separazione dopo l'etichettatura. , Così è considerato come un indicatore chimico ideale.