L'estere dell'acridina può individuare il danno del DNA causato da formaldeide e da acetaldeide!

Vari fattori esogeni ed endogeni, quali gli inquinanti ambientali, le radiazioni ionizzanti, la chemioterapia farmacologica e il metabolismo cellulare, possono causare varie forme di danno al DNA.Le rotture del doppio filamento del DNA causano i danni più gravi alla stabilità del genoma e possono minacciare la sopravvivenza delle celluleL'istituzione di un metodo semplice, rapido e sensibile per rilevare gli effetti dell'ibridazione del DNA e della genotossicità è un argomento di ricerca molto significativo.Ecco una breve introduzione al metodo di rilevamento del danno del DNA.

Quali sono i tipi di rilevamento del danno del DNA

I metodi di rilevamento dei danni al DNA includono l'elettroforesi in gel, la spettrophotometria ultravioletta, la fluorescenza e l'elettrochimica e l'analisi della chemioluminescenza.L'analisi della chemiluminescenza (CL) è stata ampiamente utilizzata nei settori dell'ambiente e delle scienze della vita a causa della sua elevata sensibilitàIl formaldeide e l'acetaldeide sono entrambi inquinanti ambientali.Studiare la quantità di esteri di acridinio incorporati nel DNA prima e dopo il danno di formaldeide e acetaldeide, causando cambiamenti nell'intensità della chemioluminescenza degli esteri di acridinio, e studiare il comportamento di danno della formaldeide e dell'acetaldeide sul DNA.Stabilire un semplice metodo di analisi della chemioluminescenza per valutare il grado di danno al DNA causato da formaldeide e acetaldeide.

Metodo degli esteri di acridina per rilevare danni ambientali al DNA

1In primo luogo, immergere la cella luminescente di vetro utilizzata in una certa quantità di acido nitrico concentrato per diverse ore, acidificarla e poi sciacquarla con acqua.Aggiungere alla cellula di luminescenza acidificata 20 μL di DNA del timo del vitello da 1 mg/mLIl DNA viene assorbito sul fondo della vasca che emette luce.e poi il DNA del timo del vitello non assorbito viene lavato con acqua secondaria per ottenere la piscina di emissione di luce con DNA assorbito.

2Aggiungere 50 μl di 9,6×10-7 g/mlestere di acridinioLa reazione di chimerizzazione è di un'ora per incorporare l'AE nella struttura a doppio filamento del DNA e lavare via l'AE non chimerica con acqua secondaria.nella cella luminescente Aggiungi reagenti di inizio della luminescenza in sequenza per rilevare la chemioluminescenza generata da AE chimerizzata nel DNAQuando si rileva il danno del DNA del timo del vitello da formaldeide e acetaldeide, aggiungere un reagente di danno al DNA dopo la chimerizzazione AE e utilizzarlo dopo un certo periodo di tempo.La seconda acqua lava via l' AE rilasciato dopo che il DNA è danneggiato, e viene aggiunto il reagente di inizio della luminescenza per rilevare l'intensità di chemi-luminescenza della chimerica AE nel DNA.

Gli studi hanno dimostrato che l'estere di acridinio può essere utilizzato come indicatore di chemioluminescenza con una buona struttura di doppia elica di DNA intercalato.Questo metodo di rilevamento è fattibile per il danno da rottura del DNA e per il metodo di rilevamento per chemioluminescenza. ha i vantaggi della semplicità e della sensibilità. gli studi di danno forniscono un metodo di ricerca semplice. i marcatori luminescenti Desheng acridine ester hanno le proprietà di una buona stabilità idrolitica,stabilità termica e elevato rapporto segnale/rumore, e le condizioni di etichettatura sono lievi, il tasso di etichettatura è elevato e la separazione non influisce sulla separazione dopo l'etichettatura. , quindi è considerato un indicatore chimico ideale.