Dettagli del prodotto
Luogo di origine: Hubei
Marca: desheng
Certificazione: ISO9000
Numero di modello: L'AR
Termini di pagamento e di spedizione
Quantità di ordine minimo: 25kg
Prezzo: Detailed discussion
Imballaggi particolari: 25kg/barilotto
Tempi di consegna: 5 giorni
Termini di pagamento: L/C, T/T, D/P, Western Union
Capacità di alimentazione: 10t / mese
MF: |
C8H18N2O6S2 |
MW: |
3020,4 g/mol |
Nome di IUPAC: |
Acido 2-[4-(2-sulfoetil)piperazina-1-yl]etanosulfonico |
CAS: |
5625-37-6 |
MF: |
C8H18N2O6S2 |
MW: |
3020,4 g/mol |
Nome di IUPAC: |
Acido 2-[4-(2-sulfoetil)piperazina-1-yl]etanosulfonico |
CAS: |
5625-37-6 |
Metodo ad alta efficienza per la preparazione di tampone di acido 1,4-piperazinedietanosulfonico
Piperazina acido dietanesulfonico PIPES ha una varietà di sistemi tampone,tra cui la soluzione tampone Transformation Buffer (chiamata anche soluzione TB) può essere utilizzata per preparare celle competenti ad alta efficienza.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellAlcuni batteri sono naturalmente competenti, come il Bacillus subtilis, e alcuni sono artificialmente competenti, come Escherichia coli.Il trattamento delle cellule riceventi con un metodo speciale può modificare la permeabilità della membrana cellulare, rendendola una cellula competente che permette alle molecole portatrici con DNA estraneo di passare.
Materia prima competente per la soluzione di TB - PIPES in polvere
Preparazione del tampone di trasformazione:
| 1 | Preparazione dell'acido dietanosulfonico piperazina PIPES 3,0 g 10 mm, CaCl2·2H2O 2,2 g 15 mm, KCl 18,6 g 250 mm |
| 2 | Aggiungere 950 ml di acqua, regolare il pH a 6,7-6,8 con 5N KOH* a basso pH insolubile |
| 3 | Aggiungere 10,9 g di MnCl2·4H2O con una concentrazione finale di 55 mM per ottenere 1 litro |
| 4 | Filtro sterilizzante, conservare a 4 gradi |
La trasformazione di cellule batteriche competenti è effettuata con il metodo del cloruro di calcio.37 gradi durante la notte finché una singola colonia non cresce.Scegliere una colonia con un diametro di 1-3 mm per inoculare il mezzo SOB in un materasso Erlenmeyer da 250 ml/3L o in un materasso Erlenmeyer da 80 ml/1L. Incubare a 18 gradi a 150-250 RPM per 19-50h.Smettere la coltura quando l' OD600 è di circa 0.4-0.8, raffreddare in acqua ghiacciata a 4 gradi per 10 minuti, centrifugare a 300 giri al minuto per 15 minuti, recuperare i batteri dopo aver rimosso il supernatante, sospendere in 1/3 di volume di soluzione di TB ghiacciata,e centrifugare di nuovo per 10 minuti per recuperare i batteri. sospendere con 1/12,5 volume di TB, aggiungere DMSO con una concentrazione finale del 7%, raffreddare per 10 minuti in aliquoti da 0,1-1 ml e conservare direttamente in azoto liquido o a -80°C.
Nella soluzione di tubercolosi di Escherichia coli in sospensione, i principali componenti includono il tampone PIPES e il cloruro di calcio per trasformare le cellule in competenti.Va notato che questo metodo è adatto per E. ceppi di coli che non contengono plasmidi e non sono adatti per plasmidi di grandi dimensioni.la dose ottimale di OD600 dei diversi ceppi batterici è anche diversa, e deve essere regolato in base a diversi esperimenti.
Esistono molti metodi per la preparazione di cellule competenti per la tubercolosi, e l'efficienza dei diversi metodi può essere diversa, nonché i ceppi o i tipi di cellule applicabili.Il PIPES prodotto da Desheng è un reagente in polvere, e soluzioni competenti per la tubercolosi possono essere preparate in base alle diverse esigenze.
Desheng Biochemical è un produttore specializzato nella produzione di tamponi biologici in Cina.Acido 4- ((2-idrossietil)-1-piperazine-etanosulfonico, acido 3-ciclo-essilaminopropanesulfonico, ecc., tutti con una purezza superiore al 99%, se necessario gli amici d'affari di voi possono contattarci!
