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Confronto dei tamponi biologici TAE e TBE

2020-09-18
Confronto dei tamponi biologici TAE e TBE

Le soluzioni tampone comunemente utilizzate includono TAE, che contiene Tris, acetato ed EDTA, e TBE (Tris-borato-EDTA).

 

Quando una corrente elettrica passa attraverso l'acqua, il pH della soluzione si mantiene stabile.una reazione di ossidazione avviene all'anodo per generare ioni ossigeno e idrogenoLa catodizzazione è una reazione di riduzione che produce ioni idrogeno e idrossido.Un buon sistema tampone dovrebbe avere una forte capacità di tamponamento per mantenere il pH della soluzione a entrambi i poli sostanzialmente stabileUn'altra funzione del tampone di elettroforesi è quella di rendere la soluzione dotata di una certa conduttività per facilitare la migrazione delle molecole di DNA.Il DNA è una sostanza alcalina che è caricata negativamente durante l'elettroforesi (pH tampone = 8) e migra dall'elettrodo negativo all'elettrodo positivo.

 

Un altro componente del tampone dell'elettroforesi è l'EDTA, il cui scopo è quello di chelare il plasma Mg2+ e prevenire l'attivazione della DNasi durante l'elettroforesi.L'EDTA può trattenere saldamente questi ioni per evitare la degradazione degli acidi nucleiciMa va notato che gli ioni di magnesio sono anche cofattori di molti enzimi, come gli enzimi di restrizione, le DNA polimerasi, ecc.quindi la concentrazione di EDTA non è generalmente troppo alta (di solito intorno a 1mM).

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Quindi quale è meglio, TAE o TBE? in realtà, quale dovrei usare per l'elettroforesi del DNA? Dipende davvero dallo scopo del vostro esperimento. Diamo un'occhiata alla differenza tra i due.

1La conducibilità del TBE è maggiore di quella del TAE. Pertanto, rispetto al TAE, è meno probabile che il TBE provochi un surriscaldamento nel serbatoio di elettroforesi.La TBE è raccomandata per l' elettroforesi a lungo termine.

 

2. L' acido borico è un inibitore dell' enzima, quindi se è necessario separare l' DNA per la reazione di digestione, si raccomanda di utilizzare TAE come soluzione tampone di elettroforesi

 

3Per i frammenti inferiori a 300 bp, la velocità di migrazione in TBE è più veloce su un gel di agarosio al 2%.

 

4Il TAE è adatto per la separazione di frammenti di grandi dimensioni. I frammenti di dimensioni superiori a 2kb migrano più velocemente in TAE (in gel di agarosio dello 0,8%), e la velocità è di circa il 10% più veloce di quella del TBE.Il TAE è più adatto per il recupero di frammenti di DNARispetto al TBE, il TAE ha una risoluzione più elevata per il DNA supercolato.

 

In sintesi, non si può generalizzare la questione se TBE o TAE sia migliore, ma si deve scegliere il sistema di tampone più adatto in funzione dello scopo specifico dell'esperimento.Il tampone biologico sviluppato da Desheng ha un ampio range di tamponi, e solo questo tipo di tampone viene utilizzato. Il sistema può preparare tamponi con una vasta gamma di valori di pH, e può fornire varie specifiche di imballaggio.Benvenuti a consultare e acquistare.