99,5% il fenolo saturato Tris ha formulato il colore CAS.77-86-1 bianco

Come è il fenolo saturato Tris ha formulato il colore CAS.77-86-1 bianco

Tris ha saturato il fenolo è un liquido trasparente giallo-chiaro, lo strato di fondo è la fase del fenolo e lo strato superiore è soluzione tampone pH>7.8 di acido cloridrico di Tris. È fenolo redistilled saturato con l'Tris-HCl (pH 8,0). Ha un odore pungente e contiene l'ossichinolina dell'antiossidante 8. Tris ha saturato il fenolo è usato per separare il DNA.

La configurazione di Tris ha saturato il fenolo: Elimini il fenolo redistilled dal frigorifero, dispongalo alla temperatura ambiente e poi fonda in un bagno d'acqua 68°C. Nonlo metta immediatamente in un bagno d'acqua 68°C per impedire il vetro scoppiare. Aggiunga l'ossichinolina 8 a 0,1% e l'etanolo di β-mercapto a 0,2%, (soluzione di riserva 14.4MOL/ML), si mescola bene, la soluzione ingiallisce, la versa in un imbuto separatore (può anche essere effettuato in un becher), aggiunge 1MOL/ML Tris (PH8.0) di altri solventi, si ripete dopo la mescolanza, la ha lasciata stare fermo finché non separi; il rilascio il liquido giallo più basso del fenolo, scarta lo strato superiore, aggiunge Tris solido circa 1g/100ml, scuote bene, rimuove la fase dell'acqua, aggiunge il   0.1MOL/ML Tris (PH8.0) per equilibrare parecchie volte, a pH 8,0, 0.1MOL/ML Tris (PH8.0) immagazzinato in una bottiglia marrone a 4 gradi.

Il lysate del tessuto, assicura che il pH sia intorno 8,0 (aggiunga 0,1 volumi di Tris-HCl di 1M, il pH 8,0, lo regolano ad intorno 8,0) e poi aggiunge 0,5 volumi di Tris ha saturato il fenolo (accantonato durante l'uso, rimuova l'uso più basso di fase del fenolo. Lo strato superiore è una soluzione Tris-HCl per impedire il fenolo il contatto dell'aria e per rallentare l'ossidazione di fenolo), 0,5 volumi di cloroformio: alcool isoamilico (24: 1), scossa per 10 secondi e poi bagno di ghiaccio per 15 minuti. Dopo centrifugazione, richieda la fase dell'acqua (strato superiore) ed aggiungere un volume uguale di isopropanolo per precipitare il DNA, risciacquila con l'etanolo di 75% e dissolvala in una quantità appropriata di TE per uso successivo.

Tris ha saturato il fenolo generalmente ha un pH maggior di 7,8 ed è usato per l'estrazione del DNA. Fra loro, il fenolo è un forte denaturante della proteina, che può denaturare e precipitare le proteine nelle cellule o in tessuti. La funzione principale di Tris è di impedire e fermare l'ossidazione di fenoli. Se i fenoli sono ossidati, i chinoni (due anelli benzenici) saranno formati. Contiene i forti radicali liberi, che possono danneggiare la struttura degli acidi nucleici. Allo stesso tempo, poiché il pH è maggior di 7, il DNA ha luogo nella fase dell'acqua ed il RNA ha luogo nella fase organica in un ambiente alcalino, di modo che il surnatante è separato ed il DNA può essere ottenuto.

Tris ha equilibrato il fenolo è altamente corrosivo, in modo da eviti il contatto o l'inalazione di pelle. Se gira rosso o marrone, indica che l'ossidazione ha accaduto e non può essere usata.

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